Molekulmasas noteikšana ar LC-MS
Neskartā molekulmasa vienmēr ir atzīta par svarīgu bioloģisko īpašību. Lai demonstrētu proteīnu/peptīdu produktus un pārbaudītu bioloģiskās vielas, tiek izmantota neskartas molekulmasas analīze. Molekulas masas mērīšana ir normatīvo vadlīniju prasība.
Yaohai Bio-Pharma piedāvā neskartu molekulmasas analīzi dabiskos, samazinātos, N-deglikozilētos apstākļos. Mēs izmantojam šķidruma hromatogrāfijas-masas spektrometriju (LC-MS), lai noteiktu neskarto molekulmasu.
Normatīvās prasības attiecībā uz molekulmasu
ICH Q6 ir ieteicams, ka “molekulāro masu (vai izmēru) nosaka, izmantojot izmēru izslēgšanas hromatogrāfiju, SDS-poliakrilamīda gēla elektroforēzi (reducējošos un nereducējošos apstākļos), masas spektrometriju (MS) un citas piemērotas metodes”.
Analītiskās metodes
| Analīze |
Metodes |
| Molekulārais svars |
LC-MS/šķidruma hromatogrāfija/elektrosmidzināšanas masas spektrometrija (LC/ES-MS) dabīgiem, reducētiem, N-deglikozilētiem proteīniem vai apakšvienībām |
Analītiskās procedūras
Neskarta molekulmasa:
- LC-MS veikšana sākotnējā paraugā, kā tas ir saņemts.
- LC-MS datu analīze.
Samazināta molekulmasa:
- proteīna parauga apstrāde ar piemērotu reducētāju;
- LC-MS veikšana reducētajam proteīnam;
- LC-MS datu analīze.
N-deglikozilētā molekulmasa:
- N-glikānu noņemšana ar piemērotu fermentu;
- LC-MS veikšana N-deglikozilētam proteīnam;
- LC-MS datu analīze.
Samazināta un N-deglikozilēta molekulmasa:
- proteīna parauga apstrāde ar piemērotu reducētāju;
- N-glikānu noņemšana ar piemērotu fermentu;
- LC-MS veikšana uz reducētu un N-deglikozilētu proteīnu;
- LC-MS datu analīze.
Olbaltumvielu apakšvienības molekulmasa:
- Apakšvienības šķelšanās
- LC-MS veikšana proteīna apakšvienībā
- LC-MS datu analīze
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NĒ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
