Galvenie enzīmi ilgstošas RNS ražošanai
mRNS kā ilgi kodējošas RNS veids Covid-19 laikā darbojās droši un efektīvi plašākam cilvēku lokam. Citas ilgi kodējošas RNS, piemēram, pašpastiprinošā RNS (saRNS) un cirkulārā mRNS (cirRNS), arī parādīja efektivitāti pirmsklīniskajos un klīniskajos pētījumos.
Ilgi kodējošas RNS liela mēroga ražošana balstās uz in vitro transkripciju (IVT) ar vairākām fermentatīvām reakcijām. RNS ražošanas posmi ietver veidnes DNS sagatavošanu, IVT RNS sintēzi, cirkulāciju, DNS noņemšanu, RNS modifikāciju (pārklājumu un astes nolikšanu) un RNS attīrīšanu.
Ir vairāki galvenie enzīmi, ko izmanto ilgi kodējošās RNS ražošanā (piemēram, mRNS, saRNS un cirRNS), tostarp restrikcijas endonukleāzes, T7 RNS polimerāze (T7 RNAP), RNāzes inhibitors, neorganiskā pirofosfatāze, DNāze I, vakcinācijas ierobežojošais enzīms un RNāze R.
|
Process
|
Enzīms
|
funkcija
|
|
Veidnes DNS sagatavošana
|
Restrikcijas endonukleāzes
|
Plazmīdas DNS (pDNS) linearizācija, lai izvairītos no garāka transkripta ģenerēšanas.
|
|
IVT RNS sintēze
|
T7 RNS polimerāze (T7 RNAP)
|
Saistīties ar T7 promotoru un ģenerēt specifisku RNS transkriptu; Spēlējiet galveno lomu IVT reakcijas laikā.
|
|
RNāzes inhibitors, rekombinants
|
Inhibē RNāzes aktivitāti IVT reakcijas laikā.
|
|
Pirofosfatāze, neorganiskā (iPPase)
|
Novērst pirofosfātu IVT reakcijas laikā.
|
|
DNS noņemšana
|
DNSāze I
|
Noņemiet DNS veidni.
|
|
RNS modifikācija
|
Vaccinia ierobežojošais enzīms
|
Pievienojiet Cap1 struktūras IVT mRNS 5′ galiem.
|
|
2'-O-metiltransferas
|
|
cirRNS bagātināšana
|
RNāze R
|
Sagremo lineāro RNS un bagātina cirkulāro RNS.
|
Yaohai Bio-Pharma piedāvā vienas pieturas CDMO risinājumu fermentiem
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NĒ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
