mRNA plaši tiek izmantota pētījumos par gēnu vai olīgopeptīdu funkcijām. Tāpat tā ir parastā profilakses un terapeitiskā biopreparātu izstrādē. Kā viens no parastajiem RNA molekulu sintēzes stratēģijas veidiem, in vitro transkripcija (IVT) ļauj mums iegūt pielāgotus transkriptus efektīvi.
Yaohai Bio-Pharma ir izveidojusi mRNA sintēzes tehnoloģiju kopumu, lai nodrošinātu augstas kvalitātes RNA, piemēram, secības dizainu un optimizāciju, IVT, tīrīšanu, liofilizāciju un lipīdu nanocilindru (LNP) kapsulēšanu. Visi produkti tiek atbrīvoti saskaņā ar striktiem kvalitātes kontroles (QC) standartiem.
Ar 2020. gada COVID-19 pandēmijas izplatīšanos mRNA tehnoloģija ir uzplūstusies ar milzumām, un tās saistītais pētījums un pielietojumi ir ieguvuši neieredzētu attīstību, tostarp infekciju profilakses preventīvie vakcinēšanas līdzekļi, terapeutiskie onkoloģijas vakcinēšanas un medicīnas līdzekļi, tumora terapija, proteīnu aizstāšanas terapija, regeneratīvā medicīna un šūnu un gēnu terapija (CGT).
mRNA vakcīna | mRNA Terapijas |
|
Procesus | Izvēles pakalpojumi | Pakalpojumu detaļas | Nodrošināšanas Periods (darbdiena) | Nodrošinājums |
mRNA Sekānas Izstrāde un Optimizācija | Kodējošo sekānu izstrāde un optimizācija | CDS sekānas izstrāde un kodona optimizācija | 1-3 | Sekānas fails |
Dizains un optimizācija nekodejošajiem secībām | Dizains un optimizācija UTR, poliA secībām | |||
Transkripcijas šablonplazmidu sagatavošana | Rekombinantu plazmidu sagatavošana | Gēnu sintēze | 7-10 | |
Plazmidu amplifikācija un izņemšana | 4 | |||
Plazmida lineārizācija un tīrīšana | ||||
mRNA in vitro transkripcija | Koptranskripcijas apkalpojums (vienkartējā metode) | In vitro transkripcija (IVT) / Kap analogs | 1-2 | Nav pieejams |
Nukleotīdu modifikācijas (UTP/CTP modifikācijas) | ||||
Dauda veidojuma noņemšana (DNase I) | ||||
Eižģenētiskais apgalvojums (divu soļu process) | IVT | 2-3 | ||
Nukleotīdu modifikācijas (UTP/CTP modifikācijas) | ||||
Dauda veidojuma noņemšana (DNase I) | ||||
mRNA tīrīšana (lietva hlorīds/magnētiskie zari) | ||||
Eižģenētisks apgalvojums | ||||
mRNA tīrīšana | Klasiska tīrīšanas shēma | Lietva hlorīda izkristalizēšanās | 1 | mRNA medicīnas vielas |
Magnētiskā zaru tīrīšana | ||||
Hromatogrāfijas kolonnas tīrīšanas shēma | Kombinācija no vairākiem hromatogrāfijas metožu | 1-2 | ||
Bufera maiņa | Ultrafiltrācija | 1 | ||
mRNA liofilizācija | Liofilizācija | Priekšuzmrazošana | 2-3 | mRNA liofilizētais pulveris |
Pirmā sausināšana (sublimācija) | ||||
Otrā sausināšana (desorcija) | ||||
mRNA inkapsulēšana | LNP kapsulēšana | LNP kapsulēšana | 2-3 | mRNA-LNP medicīniskais produkts |
Konzentracija un bufera mainīšana | ||||
mRNA kvalitātes analīze | mRNA medicīnas vielas / šķēdāmais pulveris | Konzentracija, tīrība | 1 | TESTA ZIŅOSLĒGIS |
Integritāte, apvilkšanas efektivitāte, polyA repes sadalījums | 2-5 | |||
mRNA-LNP medicīnas produkts | Encapsulācijas efektivitāte | 1 | ||
Daļiņu izmērs un sadalījums | ||||
Virsmas ielade | ||||
mRNA izpausmes apstiprināšana | 293T līdzekļu novērtējums | Līdzekļu plāšana | 4 | |
Klātienes līdzekļu transfekcija | ||||
Fluorescentā signāla novērošana | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Enzīma-saistītais imunosorbentsa pētījums (ELISA) |
5' Kapls |
▪ Bez kapla ▪ Cap0, kopīgi kapsēts ▪ Cap1, kopīgi capsēts ▪ Kap1, enzimālais apvienošana |
5’ UTR/3’ UTR |
▪ Dabas UTR sekvenca ▪ Mutanti/Jaudināta UTR sekvenca |
3' PolyA repasts |
▪ 100A ~120A repasts (iesakāms) ▪ Sadalīts polyA repasts ▪ Citi pielāgotie repasti |
Modificēti nukleozīdi |
▪ Nedaudzināti bāzes ▪ Pseudouridīns (Ψ) ▪ N1-Metils-pseudouridīns (N1Ψ) ▪ 5-metilcitozīns (m5C) ▪ 5-metiluridīns (m5U) ▪ 5-metoksioridīns (5moU) ▪ 2-tiouridīns (s2U) ▪ 2′-O-metils-U ▪ Citi grozījumi |
Integrētais pakalpojumu process
Sniedz sērijas pakalpojumus, sākot ar priekšgalu secības dizainu un beidzot ar aizgalu mRNA sagatavošanu, kvalitātes kontroli un izteiksmes validāciju.
Starptautiski inovatīvs secību dizains un optimizācija
Profesionāls mRNA secības dizains un optimizācija ļauj efektīvu mRNA izteiksmi.
Dažādas nukleotīdu modifikācijas
Efektīvi palielina mRNA izteiksmi un samazina mRNA negadīgos imūnreakcijas.
Pilna atsešanas platforma
Kombinējot konvencionālo un pašizstrādāto atsešanas metodi, tiek iegūti augstas kvalitātes mRNA paraugi.
Pilna kvalitātes kontroles platforma
Daudzveidīgas kvalitātes kontroles opcijas, lai apmierinātu ikdienas testu prasības, piemēram, koncentrācija, A260/280 tīrība un integritāte, kā arī augstākas kvalitātes kontroles prasības, piemēram, kapsēšanas efektivitāte/polyA sadale.
Ātra piegāde
Pasūtītais mRNA var tikt piegādāts jau 7 dienās, izņemot ārējo secību sintēzi.