Produkti, kas iegūti ar in vitro ciklizāciju un RNāzes R bagātināšanu, ir tālāk jāatdala no in vitro transkripcijas (IVT), tostarp ciklizācijas reakcijā nepatērētie substrāti, reakcijas blakusprodukti un niķelēta RNS.
Yaohai Bio-Pharma ir nobriedis LiCl izgulsnējums, magnētisko lodīšu attīrīšana, pašu izstrādāta attīrīšana un citi daudzveidīgi attīrīšanas risinājumi, lai efektīvi noņemtu dažādus piemaisījumus un sagatavotu ļoti tīru cirRNS.
Attīrīšanas šķīdums nelieliem cirRNS daudzumiem šūnu transfekcijai un kā daļa no eksperimentiem ar dzīvniekiem.
Attīrīšanas šķīdums nelieliem cirRNS daudzumiem šūnu transfekcijai un kā daļa no eksperimentiem ar dzīvniekiem.
Augstākas kvalitātes lietojumprogrammu scenāriji;
Stabils un mērogojams attīrīšanas process, lai atbilstu LRP ražošanas prasībām.
Process | Izvēles pakalpojums | Informācija par pakalpojumu | Piegādes periods (diena) | Piegādes |
cirRNS attīrīšana | Tradicionāls attīrīšanas risinājums | Litija hlorīda nokrišņi | 1 | cirRNS zāļu viela |
Magnētisko lodīšu attīrīšana | ||||
Ļoti tīra cirRNS attīrīšana | Preparatīvā augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfija (HPLC) | 1-2 | ||
Bufera apmaiņa | Ultrafiltrācija | 1 | ||
cirRNA kvalitātes kontrole | Koncentrācija / attīrīšana | Ultravioletā (UV) spektrofotometrija | 0.5 | Testa ziņojums |
Tīrība | Agarozes gēla elektroforēze (AGE)/E-gel | |||
HPLC nav obligāta | 1 |
Var sasniegt lietojumprogrammu scenārijus.
cirRNS ar tīrību virs 90%;
Stingri kontrolējot RNāzes eksperimentālajā vidē un palīgmateriālos, RNS degradācija tiek efektīvi novērsta.
Yaohai Bio-Pharma ir izveidojis nobriedušu cirRNS attīrīšanas šķīdumu, kas var efektīvi noņemt dažādus ar procesu saistītus piemaisījumus.
Apļveida RNS produkti, kas attīrīti ar parasto šķīdumu, joprojām ir acīmredzami sajaukti ar iegrieztu RNS un introniem.
Pēc Yaohai Bio-Pharma izstrādātā attīrīšanas šķīduma var veiksmīgi noņemt dažādus lineāros RNS piemaisījumus, piemēram, niķelēto RNS un intronus.
cirRNS ekspresijas validācija
Izmantojot parasto liposomu, attīrīta eGFP cirRNS tiek transfekēta 293T šūnās, un fluorescences signāls tiek novērots pēc 24 stundām un turpina pastiprināties pēc 48 stundām. Fluorescences signālu joprojām var noteikt 7. un 14. dienā pēc transfekcijas.