CircRNA sagatavošana prasa lineāru RNA kā ciklizācijas priekšmeti (RNA precursors), kurā RNA precursors parasti tiek gatavots, izmantojot lineāro plazmidu DNA kā transkripcijas šablonu un transkribēts in vitro ar T7 RNA polimerēza palīdzību.
Augstas kvalitātes plazmidu DNA ir būtiska in vitro transkripcijai (IVT). Balstoties uz pilnīgi attīstīto plazmidu sagatavošanas pakalpojumu platformu, Yaohai Bio-Pharma var piedāvāt augstas tīrības un standarta lineāro plazmidu DNA (pDNA) sagatavošanas pakalpojumu, lai nodrošinātu IVT produktu integritāti.
Pakalpojumu sīkāki dati
| Procesus |
Izvēles pakalpojumi |
Pakalpojumu detaļas |
Nodrošināšanas Periods (darbdiena) |
| Cikliskā plazmīda sagatavošana |
Gēnu sintēze |
Ģēnu sintēze (trešām personām) |
7-10 |
| Plazmīda amplifikācija |
Plazmīda amplifikācija |
2 |
| Plazmīdas izņemšana |
| Lineāras plazmīdas sagatavošana |
Plazmida lineārizācija un tīrīšana |
Plazmīdas lineārizācija |
1 |
| DNA lineārizācijas tīrīšana |
| Plazmīdas DNA kvalitātes kontrole |
Koncentrācija un tīrība |
Ultravioletā (UV) spektrofotometrija |
1-2 |
| Plazmīda konfigurācija |
Agarozes Gela Elektrofoze (AGE) |
| Kapilārā elektroforeze (CE)-neobligāti |
| Plazmīdas identifikācija |
Restrikcijas enzīmu identifikācija / AGE |
Mūsu iespējas
- Bezmaksas griezamo plazmīdu veidnes
Linērēšanas metožu elastīga izvēle
- Augsts atgūstamais daudzums
DZP izņemšanas un tīrīšanas metožu optimizācija, lai sasniegtu augstus atgūstamie daudzumi.
- Stipra kvalitātes kontrole
Stipras procesa kontroles standarti, pētījumu vajadzībām plazmīdu paraugu superheltiskā konformitāte pārsniedz 80%.
- Veidotu platformu procesi
Augsts standarts un augsta efektivitāte plazmīdu sagatavošanai un kvalitātes kontrolei, lai atbilstu eksperimenta prasībām.
Studija par praksi
Piemēram, paņemot Yaohai Bio-Pharma produktu mCherry circRNA, transkripcijas šablonplazmīdu superkrūtības attiecība (pētnieciskais līmenis) ir vairāk nekā 70%, ar lineārizācijas procentu tuvu 100%.
mCherry circRNA tiek gatavota, izmantojot lineārētu plazmīdu kā šablonu un transficēta 293T šūnās. Pēc 24 stundām transficēšanas tiek noteikts augsts fluorescences izteiksmes līmenis (sarkana fluorescense), kas pēc 48 stundām tiks stiprināts, un to joprojām var noteikt 7. un 14. dienā pēc transficēšanas.
mCherry olbaltumvielā tiek stabili un efektīvi izteikta, un transkripcijas šablona tīrums atbilst circRNA medicīnas produkta (DP) augstākās kvalitātes prasībām.
MCherry circRNA ārpus dzīvniekiem izteiksmes apstiprinājums
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
