Atbilstot centrālajam dogmātam, ziņdejošā RNA (mRNA) ir tilts genetiskā materiāla pārvadāšanai no DNA līdz proteīniem.
mRNA bioloģiskā loma ir kodēt proteīnus dzīvorganismā, un eukariotu organismu piemērotā mRNA sastāv no pieciem komponentiem: 5' Kapē (kapstruktūra), 5' UTR (nekodējošais reģions), ORF (atvērtā lasīšanas kārta), 3' UTR un 3' poliA repes (poliadenilāts repa).
Pakalpojumu sīkāki dati
| Procesus |
Izvēles pakalpojumi |
Pakalpojumu detaļas |
Piegādes periods (dienās) |
| mRNA Sekānas Izstrāde un Optimizācija |
Kodējošo sekānu izstrāde un optimizācija |
CDS sekas līdzināšana
CDS kodona optimizācija
|
1 |
| Dizains un optimizācija nekodejošajiem secībām |
5' UTR secības dizains un optimizācija
3' UTR secības dizains un optimizācija
polyA secības dizains un optimizācija
|
1-2 |
Izveidotas izvēles
| 5’ UTR/3’ UTR |
- Naturālā UTR secība
- Mutācijas\/Inženierētā UTR secība
|
| 3' PolyA repasts |
- 100A ~120A repiņa (iedomātais)
- Segmentēta polyA repiņa
- Cita pielāgota burtais
|
Parastie Stratēģijas mRNA secības dizainam
| mRNA sastāvdaļas |
Bioloģiskās funkcijas |
Optimizācijas stratēģijas |
| 5’ Kapšķis |
Aizsargā mRNA no degradācijas ar exonukleāziem un darbojas kopā ar polyA burtaisi 3' galā, polyA saites dzimumu un tulkotāju inicializācijas faktoru proteinu, lai sāktu proteīna tulkošanu. |
Naturālais Cap1 struktūra izvairās no modelēšanas pazīmes receptoru un tādējādi samazina naturālo imūnreakciju, kas var tikt sasniegta vienā soļā co-transkripcijas kapšķa vai divsoļu enzymatiskā kapšķa [skatiet mRNA enzymatisko kapšķa un co-transkripciju kapšķa par detaļām]. |
| 5’ UTR |
5' UTR var tikt pazīmēts ar ribozomām, regulēt mRNA tulkošanu un ietekmēt mRNA stabilitāti. |
Satur Kozaka secības bez ļoti stabila sekundārā struktūras. Priekšroka tiek dots dabīgiem UTR, kas atrodas augsti izteiktiem gēniem, piemēram, α-globīnam un β-globīnam, lai izveidotu in vitro transkripcijas (IVT) mRNA. |
| CDS |
Reģioni, kas kodē olbaltumvielas, un kodējošas secības antigēnu, antikorpusu vai citu funkcionālu olbaltumvielu gadījumā. |
Kodona optimizācija palielina tulkotāja līmeni, uzsvērtais ir fakts, ka daži neoptimālie kodoni var spēlēt nozīmīgu lomu olbaltumvielu savilktībā. |
| 3’ UTR |
Regulē mRNA tulkotāju un stabilitāti. |
Priekšroka tiek dots dabīgiem UTR, kas atrodas augsti izteiktiem gēniem, piemēram, α-globīnam un β-globīnam, lai izveidotu IVT mRNA. |
| 3’ poliA repiņa |
Regulē olbaltumvielu izpausmi un aizsargā kapu struktūru no degradācijas. |
Ir nepieciešams piemērots garums (100-150 bp); poliA repiņas kodēšana transkripcijas šablonplazmīdā nodrošina precīzāku poliA repiņas garumu. |
Mūsu iespējas
Vairākas naturālo un modificēto UTR bibliotēku avotu, kas intensīvi izpausies; veidotās UTR modificēšanas stratēģijas;
- Inovatīvā CDS optimizācijas komanda
Sadarbos ar profesionālu AI algoritmu komandu, lai veiktu kodonu optimizāciju.
- Vienmērīga polyA svītru sadale
Pievieno polyA sekvenču atbilstoši DNA šabloniem, lai precīzāk kontrolierētu mRNA garumu.
- Dažādas optimizācijas kombinācijas
Sasniedz efektīvu mRNA izpašanu ar zemu imunogēnisko reakciju.
Studija par praksi
Divu reporteru mRNA sekvas dizains: mCherry-eGFP mRNA
Yaohai Bio-Pharma mRNA pakalpojums turpinās uzlaboties ar divu reporter gēnu tandem secības dizainu un optimizāciju, kas sasniedz divu gēnu kopējo izteiksmu.
Izmantojot konvencionālu transfekcijas vielu, divgēnu tandem secība mCherry-eGFP mRNA tiek transficēta 293T lūžņu rindā, un pēc 48 stundām tiek noteiktas abas fluoresecences signālas - mCherry (sarkana) un intensīvā zaļā fluoresecences proteīna (eGFP), kas izteicas vienlaicīgi, un savienojuma grafiks ir izcelts dzeltenu.
MCherry-eGFP mRNA izteiksme 293T lūžņu rindā
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
