미니서클 DNA

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미니서클 DNA(mcDNA)는 모 플라스미드 DNA 유사 구조에서 파생된 더 작은 비바이러스 DNA 벡터입니다. 미니서클 DNA는 복제 기원(ORI)과 선택 마커(selMark) 없이 프로모터와 관심 유전자(GOI)를 포함한다는 점에서 기존 플라스미드 DNA와 다릅니다. 미니서클 DNA는 플라스미드 DNA에서 추가 서열(미니 플라스미드라고 함)을 제거하기 위한 생체 내 재조합을 통해 박테리아에서 생성됩니다. 미니서클 DNA는 안전성으로 인해 유전자 치료, DNA 백신 등 비바이러스성 벡터로 인기를 얻고 있다.

그림 1. 플라스미드 DNA(pDNA)와 미니서클 DNA(mcDNA)의 구조

미니서클 DNA 재조합 시스템

파지 λ 통합효소, 파지 P1 Cre 재조합효소, ParA 분해효소, PhiC31 인테그라 se/I-SceI를 포함하여 연구된 XNUMX가지 주요 미니서클 DNA 생체 내 재조합 시스템이 있습니다.

전략	파지 λ 통합효소	파지 P1 Cre 재조합효소	ParA 분해효소	PhiC31 통합 se/I-SceI
기구	FIS 및 IHF 단백질을 통해 기능하여 att 하이브리드 부위의 재조합을 촉매하는 티로신 재조합효소	loxP 부위에 결합할 때 양방향 재조합을 수행하는 부위 특이적인 티로신 재조합효소	두 개의 동일한 MRS 사이트 사이에서 비가역적이고 단방향 재조합을 수행하는 세린 재조합효소	attP/attB 결합 부위 사이의 단방향 재조합을 매개하는 세린 재조합효소와 I-SceI 엔도뉴클레아제는 제품 관련 불순물과 재조합되지 않은 모 플라스미드를 절단합니다.
기능	숙주 인자 FIS 및 IHF의 발현에 따라 달라집니다. 내인성 독성; 잔류 모 플라스미드 및 미니 플라스미드	잔류 모 플라스미드 및 미니 플라스미드	높은 수율; 잔류 모 플라스미드 및 미니 플라스미드	모 플라스미드의 분해와 관련된 수율 감소

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참조 :

[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. 미니서클 DNA: DNA 기반 벡터의 미래? 동향 생명공학. 2020년 38월;10(1047):1051-10.1016. 도이: 2020.04.008/j.tibtech.XNUMX.

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