재조합 DNA 기술에 사용되는 융합 파트너인 단백질 태그는 다양한 특성을 지닌 다양한 단백질/펩타이드에 대해 효과적인 단일 단계 친화성 정제를 가능하게 합니다. 이러한 중요한 이점에도 불구하고 외인성 아미노산인 태그는 단백질 구조와 생물학적 기능을 변경할 수 있습니다. 따라서 특히 바이오의약품 분야에서는 안전성과 효능을 보장하기 위해 태그가 없는(tag-free) 단백질이나 펩타이드가 더욱 선호됩니다. 융합태그를 지닌 재조합 단백질은 의약/의약품 관리기관으로부터 허가를 받기가 제한적이다.
미생물 생물학 R&D 플랫폼을 기반으로 Yaohai Bio-Pharma는 임상용 연구, 개발 및 제조의 고유한 목표를 충족하는 데 전념하는 맞춤형 비태그(Tag-free) 단백질 준비 서비스를 제공합니다.
키워드: 태그 없는 단백질 생산, 태그 없는 단백질 정제, 태그 없는 단백질 정제, 태그 없는 단백질 발현 및 정제, 태그 없는 고도의 표적 단백질
응용 분야: 인체 의약품 연구, 동물 의약품 개발, 재조합 백신 개발, 재조합 고분자 생물학적 제제 생산
우리는 미생물 균주 공학, 발효 및 제품 정제 분야에 경험이 있습니다.
박테리아: 대장균 (E. coli)
누룩: 피치아 파스토리스(P. Pastoris), 사카로마이세스 세레비시아(S. cerevisiae), 한세눌라 폴리모르파(H. polymorpha)
양식적임 | 재조합 단백질 |
출발 물질 | 유전자 서열, 재조합 플라스미드 또는 조작된 균주 |
산출물 | 정화: >80%, >85%, >90% 수량: 0.2~10g(프로젝트에 따라 결정) |
발현 시스템 및 형성 |
E. 대장균 주변세포질 분비, 가용성 및 봉입체 발현; 효모 세포내 또는 분비 발현 |
분석 방법 | 자외선(UV), 비신코닌산 분석(BCA), Bradford 또는 Lowry(수량) 정제 테스트를 위한 도데실황산나트륨 폴리아크릴아미드 겔 전기영동(SDS-PAGE) 선택 사항: 웨스턴 블롯(WB), 효소 결합 면역흡착 분석(ELISA), 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) |
잔류 불순물 | 내독소(선택사항) |
솔루션 |
서비스 내용 |
최소 일정(근무일) |
유전자 합성 |
특정 발현 숙주에 대한 코돈 최적화 |
7 ~ 10 일 |
유전자 합성 |
||
플라스미드/벡터 구축 |
플라스미드/벡터로 클로닝 |
2 일 |
플라스미드 변환 |
||
중합효소연쇄반응(PCR) 검증, 제한효소 소화, 유전자 염기서열분석 |
3 일 |
|
단백질 발현 E. 대장균 |
플라스미드 형질전환, |
2 일 |
진탕 플라스크에서 배양 |
3 일 |
|
7L-자루 발효, 최적화 |
4일/배치 |
|
태그 없는 단백질 정제, 최적화 |
5~10일/배치 |
|
나트륨 도데실-황산염 폴리아크릴아미드 겔 전기영동(SDS-PAGE)에 의한 테스트 |
||
효모의 단백질 발현 |
효모 수용 세포 준비 |
4 일 동안 |
플라스미드 선형화 및 전기 변환 |
||
7L-자루 발효, 최적화 |
5 일 동안 |
|
태그 없는 단백질 정제, 최적화 |
7일/배치 |
|
태그 없는 단백질 정제 |
5~10일/배치 |
|
SDS-PAGE에 의한 QC |