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맞춤형 saRNA 합성

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IVT RNA

맞춤형 saRNA 합성

레플리콘 RNA로도 알려진 자가 증폭 mRNA(saRNA)는 시험관 내 전사(IVT) mRNA 서열과 알파바이러스 또는 플라비바이러스로부터 유래된 바이러스 복제 유전자를 암호화합니다. 바이러스 복제효소 유전자는 mRNA의 자가 증폭을 허용하여 비증폭 mRNA에 비해 단백질 발현이 증가하고 최소 요구량의 RNA가 필요합니다. 또 다른 측면은 saRNA가 상대적으로 큰 분자(14kb 초과)라는 것입니다.

Yaohai Bio-Pharma는 비증폭 mRNA 및 자가 증폭 mRNA(1000nt~14000nt)를 제공하기 위해 서열 설계 및 최적화, IVT, 정제, 동결건조 및 지질 나노입자(LNP) 캡슐화 등 일련의 mRNA 합성 기술을 확립했습니다. . 모든 제품은 엄격한 품질 관리 기준에 따라 출시됩니다.

그림 1 IVT mRNA의 구조적 특징: 기존, 원형 및 자가 증폭 mRNA.

자가 증폭 mRNA의 서열 특징

자가 증폭 RNA는 알파바이러스인 베네수엘라 말 뇌염 바이러스(VEEV)에서 파생된 1개의 비구조 단백질(nsP2, nsP3, nsP4 및 nsP1로 지정됨)로 구성됩니다. 이 중 nsP7은 GTase와 N2MTase라는 이중 효소 활성을 나타내는 반면, nsP0는 IVT mRNA를 캡핑하여 Cap 2 구조를 생성하는 데 중추적인 RTPase 활성을 보유합니다. 또한 nsP3는 프로테아제 및 헬리카제 역할을 하여 전체 nsP 복합체의 복잡한 처리를 촉진합니다. nsPXNUMX의 정확한 기능은 여전히 ​​파악하기 어렵습니다. 그러나 다양한 숙주 세포 단백질과 상호작용하여 숙주에 의해 수행되는 항바이러스 반응을 약화시키는 데 기여합니다.

알파바이러스 하위게놈 프로모터(SGP) 영역은 관심 유전자(GOI) 앞에 위치합니다. SGP 요소는 바이러스 nsP 단백질을 코딩하는 서열의 판독을 우회함으로써 GOI 전사의 개시를 촉진합니다. 

그림 2. Yaohai Bio-Pharma RNASci 플랫폼의 eGFP saRNA 합성 및 세포 분석. 

saRNA의 맞춤형 솔루션

saRNA의 합성 프로토콜은 mRNA와 유사합니다: 맞춤형 mRNA 합성

  • 시퀀스 디자인
  • 플라스미드 템플릿 준비
  • 시험관내 전사(IVT)
  • mRNA 효소 캡핑
  • mRNA 동시 전사 캡핑
  • mRNA 정제
  • mRNA 동결건조
  • LNP 캡슐화
  • 분석 및 테스트

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