중심 교리에 따르면 메신저 RNA(mRNA)는 DNA에서 단백질로 유전 물질을 전달하는 가교 역할을 합니다.
mRNA는 생체 내에서 단백질을 암호화하여 생물학적 역할을 하며, 진핵생물에서 성숙한 mRNA는 5' Cap(캡 구조), 5' UTR(비코딩 영역), ORF(개방형 판독 프레임), 3' UTR의 다섯 가지 구성 요소로 구성됩니다. , 및 3' 폴리A 꼬리(폴리아데닐레이트 꼬리).
방법 | 선택서비스 | 서비스 내용 | 배송기간(일) |
mRNA 서열 설계 및 최적화 | 코딩 시퀀스의 설계 및 최적화 |
CDS 서열 정렬 CDS 코돈 최적화 |
1 |
비코딩 시퀀스의 설계 및 최적화 |
5' UTR 시퀀스 설계 및 최적화 3' UTR 시퀀스 설계 및 최적화 폴리A 서열 설계 및 최적화 |
1-2 |
5' UTR/3' UTR |
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3' 폴리A 테일 |
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mRNA 구성 요소 | 생물학적 기능 | 최적화 전략 |
5' 캡 | 엑소뉴클레아제에 의한 분해로부터 mRNA를 보호하고 3' 말단의 폴리A 꼬리, 폴리A 결합 단백질 및 번역 개시 인자 단백질과 협력하여 단백질 번역을 시작합니다. | 자연적인 Cap1 구조는 패턴 인식 수용체를 피하고, 따라서 자연적인 면역 반응을 감소시키는데, 이는 XNUMX단계 공동 전사 캡핑이나 XNUMX단계 효소 캡핑을 통해 달성할 수 있습니다.[자세한 내용은 mRNA 효소 캡핑 및 공동 전사 캡핑 참조]. |
5'UTR | 5' UTR은 리보솜에 의해 인식되고 mRNA의 번역을 조절하며 mRNA의 안정성에 영향을 미칠 수 있습니다. | 매우 안정적인 2차 구조가 없는 Kozak 서열을 포함합니다. 고도로 발현된 유전자의 천연 UTR은 α-글로빈 및 β-글로빈과 같은 시험관내 전사(IVT) mRNA에 선호됩니다. |
CDS | 항원, 항체 또는 기타 기능성 단백질에 대한 단백질 코딩 영역 및 코딩 서열. | 코돈 최적화는 특정 비최적 코돈이 단백질 접힘에서 역할을 할 수 있다는 점을 지적하면서 번역 수준을 높입니다. |
3'UTR | mRNA 번역 및 안정성을 조절합니다. | 고도로 발현된 유전자의 천연 UTR은 α-글로빈 및 β-글로빈과 같은 IVT mRNA에 대해 선호됩니다. |
3' 폴리A 테일 | 단백질 발현을 조절하고 캡 구조가 분해되지 않도록 보호합니다. | 적절한 길이(100-150bp)가 필요합니다. 전사 템플릿 플라스미드에서 폴리A 꼬리를 인코딩하면 보다 정의된 폴리A 꼬리 길이가 보장됩니다. |
고도로 표현된 자연 및 변형 UTR 라이브러리의 다양한 소스 성숙한 UTR 수정 전략;
전문 AI 알고리즘 팀과 협력하여 코돈 최적화를 완료하세요.
DNA 주형에 따라 폴리A 서열을 추가하여 mRNA 길이를 보다 정확하게 제어합니다.
낮은 면역원성으로 효율적인 mRNA 발현을 달성합니다.
이중 리포터 mRNA의 서열 설계: mCherry-eGFP mRNA
Yaohai Bio-Pharma의 mRNA 서비스는 이중 유전자의 공동 발현을 달성하는 이중 리포터 유전자 탠덤 서열의 설계 및 최적화를 통해 지속적으로 업그레이드되고 있습니다.
기존의 형질감염 시약을 사용하여 이중 유전자 탠덤 서열 mCherry-eGFP mRNA를 293T 세포에 형질감염시키고, 48시간 후에 mCherry(적색)와 향상된 녹색 형광 단백질(eGFP)의 두 가지 형광 신호를 동시 발현으로 검출하고, 적층된 그래프가 노란색으로 강조표시됩니다.
293T 세포에서 mCherry-eGFP mRNA 발현