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mRNA 공전사 캡핑

mRNA 공전사 캡핑

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IVT RNA

mRNA 동시 전사 캡핑

두 단계 효소적 캡핑에 비해, 일 단계的同时 전사 캡핑 방법은 공정 흐름을大幅히 줄일 수 있습니다. 이 방법은 결과 지향적이며 체외 전사 (IVT) 반응에 캡 아날로그를 추가하는 것을 포함합니다. 캡 아날로그는 전사 시작 시 도입될 수 있으며, 전사가 완료되면 캡 구조를 가진 mRNA를 얻을 수 있습니다. 현재 세 번째 세대의 캡 아날로그는 역방향 캡핑을 방지하고 전사 생성물에 직접 Cap 1 구조를 추가할 수 있습니다.

MRNA의 체내 면역원성 및 번역 효율성을 고려할 때, IVT 과정에서는 종종 특정 수정된 NTPs가 사용되며, 일반적인 수정된 핵산은 피우리딘 (Ψ), N1-메틸-피우리딘 (N1Ψ), 그리고 5-메틸시토신 (5mC)입니다.

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그림: mRNA 동시 전사 및 캡핑 반응 다이어그램

서비스 상세

서비스

서비스 상세

납기(작업일)

동시 전사 캡핑

체외 전사 반응 (Clean Cap 아날로그) 1-2
뉴클레오타이드 변형 (Ψ/N1Ψ/5mC)
DNA 템플릿 제거 (DNase I)

IVT 조건 최적화 - 선택사항

반응 구성 요소 설계 및 최적화 3-7
우리의 특징
  • 다양한 뉴클레오타이드 변형 전략

여러 선택적인 뉴클레오타이드 변형 전략이 단백질 발현을 개선할 수 있습니다.

  • 최적화된 반응 시스템

높은 전사 비율과 높은 캡핑 효율을 달성합니다.

  • 안정적인 캡핑 과정

95% 이상의 캡핑 비율을 달성하십시오.

  • RNase에 대한 엄격한 관리

실험 환경 및 소모품에서 RNase를 엄격히 통제하여 mRNA 분해를 효과적으로 방지합니다.

사례 연구

야오하이 바이오-파마는 깨끗한 캡 아날로그를 사용하여 Cap1 구조를 직접 추가하면서 반대 방향 캡핑을 피하는 성숙한 공전사적 캡핑 공정 플랫폼을 구축했습니다. 표준화된 샘플 사전 처리와 모세관 전기영동(CE) 검출 후, 강화 녹색 형광 단백질(eGFP) mRNA의 캡핑 비율은 95% 이상에 도달할 수 있습니다.

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eGFP mRNA 캡핑 효율 95% 이상

공전사적 캡핑으로 준비된 eGFP mRNA와 mCherry mRNA가 각각 293T 세포에 전달되며, 48시간 후 강한 형광 신호가 관찰되며 이는 mRNA가 293T 세포에서 효율적으로 발현됨을 나타냅니다.

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293T 세포에서의 eGFP mRNA 및 mCherry mRNA 발현

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