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체외 전사, IVT

체외 전사, IVT 대한민국

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IVT RNA

IVT, 체외 전사

mRNA의 대량 생산과 관련하여 시험관 내 전사(IVT)가 보다 효율적이고 성숙한 방법입니다. IVT 반응은 T7 프로모터를 포함하는 선형화된 플라스미드 DNA를 주형으로 채택하고, mRNA는 T7 RNA 폴리머라제의 존재 하에 뉴클레오시드 삼인산(NTP)을 기질로 합성합니다.

뉴클레오티드 변형은 변형되지 않은 mRNA 분자가 세포내 RNA 센서에 의해 인식되어 선천적 면역을 활성화시키는 mRNA 탐색의 획기적인 발전입니다. 생체 내 mRNA 면역원성과 번역 효율성을 고려하기 위해 IVT 과정은 일반적으로 특정 종류의 변형된 NTP를 사용하며, 일반적인 변형된 뉴클레오티드는 슈도우리딘(Ψ), N1-메틸-슈도우리딘(N1Ψ) 및 5-메틸사이토신(5mC)입니다.

정의되지 않은

mRNA의 시험관내 전사 과정

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시험관내 전사(IVT) 반응 다이어그램

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배송기간(평일)
시험관내 전사(IVT)
 IVT, 시험관 내 전사 1
뉴클레오티드 변형(Ψ/N1Ψ/5mC 등)
DNA 템플릿 제거(DNase I)
IVT 조건 최적화 - 선택 사항
 IVT 반응 구성 요소 설계 및 최적화 2-5
우리의 특징
  • 다양한 뉴클레오티드 변형 전략

생체 내에서 mRNA 안정성과 단백질 발현을 향상시킵니다.

  • 엄격한 테스트 설계 및 최적화

최대 10kb의 mRNA 단편 준비가 가능합니다.

  • 효율적인 전사

IVT 반응 조건을 최적화함으로써 전사 속도는 최대 1:200입니다.

  • RNase의 엄격한 제어

실험 환경과 소모품을 통해 RNase를 엄격하게 제어하면 mRNA 분해를 효과적으로 방지할 수 있습니다.

사례 연구

현재 IVT 반응 시스템은 임의 길이의 mRNA가 아닌 약 100nt 길이의 합성 시스템에 대략 최적화되어 있습니다. mRNA 서열이 길수록 전사가 더 어려워지고 분해되기 쉽습니다.

Yaohai Bio-Pharma는 약 10kb 길이의 맞춤형 mRNA 서열을 제조하기 위해 1:135의 높은 전사율을 갖는 고품질 샘플을 성공적으로 제조했으며 선형화된 플라스미드 135μg 후 1μg의 초기 정제된 mRNA 산물을 얻었습니다. 엄격한 실험 설계, 반응 조건의 지속적인 최적화 및 RNase의 엄격한 제어를 통해 시험관 내에서 전사되었습니다.

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mRNA 식별(아가로스 겔 전기영동)

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