CircRNA 준비는 순환화를 위해 선형 RNA를 전구체 물질 (RNA 전구체) 로 필요로 하며, 이때 RNA 전구체는 일반적으로 선형화된 플라스미드 DNA를 전사 템플릿으로 사용하여 T7 RNA 폴리머라제의 도움을 받아 체외에서 전사됩니다.
체외 전사(IVT)에 있어 고품질의 플라스미드 DNA는 필수적입니다. 성숙된 플라스미드 준비 서비스 플랫폼을 기반으로 야오하이 바이오파마는 IVT 제품의 완전성을 보장하기 위한 고순도 및 표준 선형화된 플라스미드 DNA(pDNA) 준비 서비스를 제공합니다.
공정 | 선택적 서비스 | 서비스 상세 | 납기(작업일) |
순환 플라스미드 준비 | 유전자 합성 | 유전자 합성 (제3자) | 7-10 |
플라스미드 증폭 | 플라스미드 증폭 | 2 | |
플라스미드 추출 | |||
선형화된 플라스미드 준비 | 플라스미드 선형화 및 정제 | 플라스미드 선형화 | 1 |
DNA 선형화 후 정제 | |||
플라스미드 DNA 품질 관리 | 농도 순도 | 자외선 (UV) 분광광도계 | 1-2 |
플라스미드 구조 | 아가로스 겔 전기영동 (AGE) | ||
모세관 전기영동 (CE)-선택사항 | |||
플라스미드 식별 | 제한 효소 식별/ AGE |
선형화 방법의 유연한 선택
DNA 추출 및 정제 방법을 최적화하여 높은 회수율을 달성합니다.
엄격한 공정 관리 기준, 연구용 플라스미드 샘플의 초나선 구조 비율이 80% 이상입니다.
고기준 및 고효율의 플라스미드 준비 및 품질 관리 서비스로 실험 요구를 충족시킵니다.
Yaohai Bio-Pharma의 제품 mCherry circRNA를 예로 들면, 전사 템플릿 플라스미드 샘플(연구 등급)의 초나선 비율이 70% 이상이며, 선형화 비율은 거의 100%에 가깝습니다.
mCherry circRNA는 선형화된 플라스미드를 템플릿으로 준비되어 293T 세포에 전달됩니다. 전달 후 24시간 뒤 고강도 형광 발현(적색 형광)이 탐지되며, 48시간 후 더욱 증가하며, 전달 후 7일째와 14일째에도 여전히 탐지될 수 있습니다.
mCherry 단백질은 안정적이고 효율적으로 발현되며, 전사 템플릿 순도는 고품질의 circRNA 의약품(circRNA DP) 요구 사항을 충족할 수 있습니다.
MCherry circRNA의 체외 발현 검증