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아미노산 탈암모니아화

아미노산 탈암모니아화

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미생물 CDMO

아미노산 탈암모니아화

글루타민과 아스파라긴 측 사슬의 탈암모니아화는 단백질 생물제제의 특성에 미치는 영향 측면에서 일반적인 변형입니다. 탈암모니아화는 글루타민 잔기에서도 발생할 수 있지만, 보통 훨씬 더 낮은 비율로 나타납니다. 탈암모니아화 속도는 온도, pH, 국소 단백질 구조 및 인접한 아미노산 잔기에 의해 영향을 받습니다.

야오하이 바이오파마는 액체 크로마토그래피-질량 분석(LC-MS)을 통해 아미노산 탈암모니아화를 감지할 수 있는 아미노산 탈암모니아화 테스트 서비스를 제공합니다.

우리는 재조합 서브유닛 백신, 나노바디/VHHs/단일영역 항체(sdAbs), 항체 조각, 호르몬/펩타이드, 사이토카인, 성장 인자(CF), 효소, 콜라겐 등을 포함한 다양한 대분자의 단백질 구조 특성을 분석하는 데 참여해 왔습니다.

아미노산 탈암모니아화에 대한 규제 요구사항

ICH Q6B 가이드라인에 따르면, 디아미데이션 형태는 크로마토그래피, 전기영동 및 기타 관련 분석 방법을 통해 검출되고 특성화될 수 있습니다.

분석 방법
분석 방법
탈암모화 액체 크로마토그래피-질량 분광법 (LC-MS)
절차들

예: 아스파틱 디아미데이션

1. 효소 소화

2. 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC) 조건 하의 LC-MS

3. 데이터 분석

아스파라긴 디아미데이션은 라세미화와 수해를 일으키는 석신醯중간체(Suc)를 통해 발생하며, 이는 L-아스파테이트, L-이소아스파테이트, D-아스파테이트 및 D-이소아스파테이트 등 네 가지 아스파테이트 이성질체를 생성합니다.

이론적으로 글루타민 디아미데이션은 아스파라긴 디아미데이션과 유사한 과정을 통해 네 가지 대응 글루타메이트 이성질체를 생성할 수 있습니다.

고해상도 질량 분광계는 Asn/Gln을 포함한 펩타이드와 그에 해당하는 탈아미노화된 대응체 Asp/Glu 간의 1-Da 질량 차이를 쉽게 식별할 수 있습니다.

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