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mRNA 생산을 위한 효소

mRNA 생산을 위한 효소

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양식적임

RNA 생산을 위한 효소

Long-RNA 생산을 위한 주요 효소

긴 코딩 RNA의 일종인 mRNA는 코로나19 기간 동안 더 광범위한 사람들에게 안전하고 효율적으로 수행되었습니다. 자가 증폭 RNA(saRNA) 및 원형 mRNA(circRNA)와 같은 다른 긴 코딩 RNA도 전임상 및 임상 연구에서 효율성을 보여주었습니다.

긴 코딩 RNA의 대규모 생산은 여러 효소 반응에 의한 시험관 내 전사(IVT)에 의존합니다. RNA 생산 단계에는 주형 DNA 준비, IVT RNA 합성, 순환, DNA 제거, RNA 변형(캡핑 및 테일링) 및 RNA 정제가 포함됩니다.

제한 엔도뉴클레아제, T7 RNA 폴리머라제(T7 RNAP), RNase 억제제, 무기 피로포스파타제, DNase I, 백시니아 캡핑 효소 및 RNase R을 포함하여 긴 코딩 RNA 생산(예: mRNA, saRNA 및 circRNA)에 사용되는 몇 가지 주요 효소가 있습니다.

방법

효소

함수

템플릿 DNA 준비

제한 엔도뉴클레아제

더 긴 전사물 생성을 방지하기 위한 플라스미드 DNA(pDNA)의 선형화.

IVT RNA 합성

T7 RNA 폴리머라제(T7 RNAP)

T7 프로모터에 결합하여 특정 RNA 전사물을 생성합니다. IVT 반응 중에 중요한 역할을 합니다.

RNase 억제제, 재조합

IVT 반응 중 RNase 활성을 억제합니다.

무기 피로포스파타제(iPPase)

IVT 반응 중 피로인산염을 방지합니다.

DNA 제거

DNase I

DNA 템플릿을 제거합니다.

RNA 변형

백시니아 캡핑 효소

IVT mRNA의 1' 말단에 Cap5 구조를 추가합니다.

2'-O-메틸트랜스페라스

circRNA 농축

RNase R

선형 RNA를 소화하고 원형 RNA를 풍부하게 합니다.
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