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홈페이지 > 양식적임 > 단백질 > 재조합 효소 > mRNA 생산을 위한 효소
긴 코딩 RNA의 일종인 mRNA는 코로나19 기간 동안 더 광범위한 사람들에게 안전하고 효율적으로 수행되었습니다. 자가 증폭 RNA(saRNA) 및 원형 mRNA(circRNA)와 같은 다른 긴 코딩 RNA도 전임상 및 임상 연구에서 효율성을 보여주었습니다.
긴 코딩 RNA의 대규모 생산은 여러 효소 반응에 의한 시험관 내 전사(IVT)에 의존합니다. RNA 생산 단계에는 주형 DNA 준비, IVT RNA 합성, 순환, DNA 제거, RNA 변형(캡핑 및 테일링) 및 RNA 정제가 포함됩니다.
제한 엔도뉴클레아제, T7 RNA 폴리머라제(T7 RNAP), RNase 억제제, 무기 피로포스파타제, DNase I, 백시니아 캡핑 효소 및 RNase R을 포함하여 긴 코딩 RNA 생산(예: mRNA, saRNA 및 circRNA)에 사용되는 몇 가지 주요 효소가 있습니다.
|
방법 |
효소 |
함수 |
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템플릿 DNA 준비 |
제한 엔도뉴클레아제 |
더 긴 전사물 생성을 방지하기 위한 플라스미드 DNA(pDNA)의 선형화. |
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IVT RNA 합성 |
T7 RNA 폴리머라제(T7 RNAP) |
T7 프로모터에 결합하여 특정 RNA 전사물을 생성합니다. IVT 반응 중에 중요한 역할을 합니다. |
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RNase 억제제, 재조합 |
IVT 반응 중 RNase 활성을 억제합니다. |
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무기 피로포스파타제(iPPase) |
IVT 반응 중 피로인산염을 방지합니다. |
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DNA 제거 |
DNase I |
DNA 템플릿을 제거합니다. |
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RNA 변형 |
백시니아 캡핑 효소 |
IVT mRNA의 1' 말단에 Cap5 구조를 추가합니다. |
|
2'-O-메틸트랜스페라스 |
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| circRNA 농축 | RNase R | 선형 RNA를 소화하고 원형 RNA를 풍부하게 합니다. |
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