Všetky kategórie
Minicircle DNA

Modalita

Minicircle DNA

Minicircle DNA (mcDNA) je menší nevírusový DNA vektor odvodený od rodičovskej plazmidovej DNA-podobnej štruktúry. Minicircle DNA sa líši od bežného plazmidového DNA tým, že obsahuje promotor a geny voľby (GOI), bez pôvodu replikácie (ORI) a selekčnej značky (selMark). Minicircle DNA sa produkujú v baktériách prostredníctvom in vivo rekombinácie na odstránenie ďalších postupov (nazývaných mini-plazmid) z plazmidovej DNA. Vďaka svojej bezpečnosti sa minicircle DNA stali populárne ako nevírusový vektor pre génovú terapiu, DNA vakcíny atď.

图片

Obrázok 1. Štruktúra plazmidovej DNA (pDNA) a Minicircle DNA (mcDNA)

Rekombinácia systémov Minicircle DNA

Bolo vyštudovaných štyri hlavné in vivo rekombinačné systémy minicircle DNA, vrátane Phage λ integrázy, Phage P1 Cre rekombinázy, ParA resolvázy, PhiC31 integrazy/I-SceI.

Stratégia

Phage λ integráza

Phage P1 Cre rekombináza

ParA resolváza

PhiC31 integraza/I-SceI

Mechanizmus

Tyrosínová rekombináza, ktorá funkcionuje prostredníctvom proteínov FIS a IHF na katalýze rekombinácie att hybridových miest

Lokálna tyrosínová rekombináza, ktorá vykonáva dvojsmernú rekombináciu pri väzbe na lokP miesta

Serínová rekombináza, ktorá vykonáva nespraviteľnú a jednosmernú rekombináciu medzi dvoma identickými MRSmiestami

Serínová rekombináza, ktorá mediuje jednosmernú rekombináciu medzi attP/attB vázanými miestami, zatiaľ čo endonukleáza I-SceI rozkladá produktove spojené nepuritány a nerekombinované rodičovské plazmidy

Vlastnosti

Závisí od expresie hostitelských faktorov FIS a IHF; vlastná toxicitás; Zostávajúce rodičovské plazmidy a mini-plazmidy

Zostávajúce rodičovské plazmidy a mini-plazmidy

Vysoká výnosnosť; Zostávajúce rodičovské plazmidy a mini-plazmidy

Degradácia rodičovského plazmidu spôsobuje zníženú výnosnosť

Yaohai Bio-Pharma Ponúka Komplexné Riešenie CDMO pre Minikruhové DNA
Referencia:

[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minicircle DNA: Budúcnosť pre DNA-bazované vektory? Trends Biotechnol. 2020 Oct;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.

Dostaňte bezplatnú ponuku

Get in touch