Analýza |
Metódy |
Molekulová hmotnosť |
Kvapalinová chromatografia-hmotnostná spektrometria (LC-MS) / kvapalinová chromatografia/elektrosprejová hmotnostná spektrometria (LC/ES-MS) intaktných, redukovaných a N-deglykozylovaných proteínov |
Analýza veľkostných variantov |
LC-MS, chromatografia s vylučovacou veľkosťou-hmotnostná spektrometria (SEC-MS), dynamický rozptyl svetla (DLS), analytická ultracentrifugácia (AUC), chromatografia s vylúčením veľkosti-rozptyl svetla z viacerých uhlov (SEC-MALS) |
Analýza variantu náboja |
LC-MS, iónomeničová chromatografia-hmotnostná spektrometria (IEX-MS) |
Tepelná stabilita (Tm) |
Diferenciálny skenovací kalorimeter (DSC) |
Koeficient extinkcie |
Analyzátory aminokyselín |
Peptidové mapovanie |
LC-MS po štiepení proteázou |
Pokrytie proteínovej sekvencie |
LC-MS po 1-3 štiepení |
N-koncové sekvenovanie |
LC-MS po štiepení, stanovené mapovaním peptidu Edmanovou degradáciou |
C-terminálne sekvenovanie |
LC-MS po štiepení |
Disulfidové väzby |
LC-MS po štiepení |
Voľné sulfhydrylové skupiny |
Ellmanov test |
Oxidácia aminokyselín |
LC-MS, vysokoúčinná kvapalinová chromatografia s reverznou fázou (RP-HPLC) alebo hydrofóbna interakčná chromatografia - vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HIC-HPLC) a hmotnostná spektrometria (MS) |
Izomerizácia aminokyselín |
LC-MS po enzymatickom štiepení |
Deamidácia |
LC-MS po enzymatickom štiepení |
Modifikácia N-terminálu |
LC-MS po štiepení |
Úprava C-terminálu |
LC-MS po štiepení |
C-koncový lyzínový výstrižok |
LC-MS po štiepení |
Profilovanie N-glykánu |
LC-MS uvoľnených glykánov |
N-glykozylačné miesto |
LC-MS po enzymatickom štiepení |
Obsadenie miesta N-glykozylácie |
LC-MS po štiepení deglykozylázou a proteázou (trypsínom alebo Asp-N). |
Štruktúra vyššieho rádu |
Infračervený spektrometer (IR) s kruhovým dichroizmom (CD) |