Určenie molekulárnej hmotnosti pomocou LC-MS
Molekulárna hmotnosť v celkoch je vždy považovaná za dôležitú charakteristiku biologickej liečiv. Analýza celej molekulárnej hmotnosti sa používa na preukázanie produkcie bílkovín/peptidov a overenie biologickej liečivy. Meranie molekulárnej hmotnosti je požiadavkou regulačných smerníc.
Yaohai Bio-Pharma ponúka analýzu celej molekulárnej hmotnosti v podmienkach natívnych, redukovateľných, N-odškvočených. Používame kapalinovú chromatografiu-masovú spektrometriu (LC-MS) na určenie celej molekulárnej hmotnosti.
Regulačné požiadavky na molekulárnu hmotnosť
V ICH Q6 sa odporúča „určiť molekulárnu hmotnosť (alebo veľkosť) pomocou chromatografie s rozdelením podľa veľkosti, SDS-polyakrylamidovej elektroforezy (v redukujúcich a ne-redukujúcich podmienkach), masovou spektrometriou (MS) a inými príslušnými technikami“.
Analytické metódy
| Analýza |
Metódy |
| Molekulová hmotnosť |
LC-MS / Kapalná chromatografia/Elektrosprájová hmotnostná spektrometria (LC/ES-MS) prerodzajné, redukované, N-deglykosylovate proteíny alebo subjednotky |
Analytické postupy
Celková molekulová hmotnosť:
- Provádzanie LC-MS na pôvodnom vzore v stave, aký bol doručený.
- Analýza údajov LC-MS.
Redukovaná molekulová hmotnosť:
- Obrábanie proteínového vzorky vhodným redukujúcim agentom;
- Provádzanie LC-MS na redukovanom proteíne;
- Analýza údajov LC-MS.
N-deglykosylovaná molekulová hmotnosť:
- Odstránenie N-glykanov pomocou vhodného enzymu;
- Provádzanie LC-MS na N-deglykosylovanej proteíne;
- Analýza údajov LC-MS.
Redukovaná a N-deglykosylovaná molekulová hmotnosť:
- Obrábanie proteínového vzorky vhodným redukujúcim agentom;
- Odstránenie N-glykanov pomocou vhodného enzymu;
- Provádzanie LC-MS na redukovanom a N-deglykosylovanom proteíne;
- Analýza údajov LC-MS.
Molekulová hmotnosť podjednotky proteínu:
- Rozdelenie podjednotky
- Provádzanie LC-MS na podjednotke proteínu
- Analýza údajov LC-MS
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
