Význam kmeňového inžinierstva
Cieľom kmeňového inžinierstva je vytvoriť hostiteľa výrazu s charakteristikami očakávaní, čo je nevyhnutné pre vývoj biologických CMC a určuje kvalitu a konzistenciu produktu a výrobného procesu.
Kľúčové slová: kmeňové genetické inžinierstvo a skríning, proteínová expresia kmeňov, mikrobiálne bunkové inžinierstvo, bakteriálne kmeňové inžinierstvo, kvasinkové kmeňové inžinierstvo, konštrukcia prokaryotických mikroorganizmov, inžinierstvo eukaryotických mikroorganizmov, skonštruovaný kmeň
Použitie: humánna medicína, medicína zvierat, vakcína, syntetická biológia, rekombinantná biologika s veľkou molekulou, biologické činidlo
Služby kmeňového inžinierstva Yaohai Bio-Pharma
Vďaka viac ako 10-ročným skúsenostiam CDMO v mikrobiálnej biológii sme nazhromaždili bohaté skúsenosti s navrhovaním a výberom rôznych typov plazmidových vektorov a mikrobiálnych hostiteľov (baktérie, kvasinky). Môžeme nájsť najlepší expresný systém pre vaše jedinečné biologické látky.
Zhromaždili sme rôznych mikrobiálnych hostiteľov s jasnými zdrojmi a štandardným CoA vrátane
baktérie: Escherichia coli (E. coli)
Kvasinky: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Detaily služby
Služby
|
Detaily služby
|
Minimálna časová os/deň
|
dodávky
|
Kmeňové inžinierstvo
|
Vyradenie génu alebo vymazanie génu
|
TBD
|
Kmenotechnická správa
|
Zaklopanie génu alebo vloženie génu
|
Konštrukcia kmeňa (E. coli)
|
Transformácia plazmidu (viacerí hostitelia)
|
5
|
COA komerčných hostiteľov,
Správa o stavbe kmeňa
|
PCR overenie
|
Čistenie kmeňa
|
Konzervácia kmeňa
|
Konštrukcia kmeňa (kvasinky)
|
Príprava kompetentných kvasinkových buniek
|
10
|
Linearizácia plazmidu
|
Elektro transformácia
|
Skríning rezistencie/nutričného deficitu
|
Čistenie kmeňa
|
Konzervácia kmeňa
|
Vhodný skríning hostiteľa
|
Extrakcia plazmidovej alebo genómovej DNA
|
15-20
|
Proces skríningu hostiteľa,
Správa o testovaní upravených kmeňov
|
PCR overenie, štiepenie reštrikčnými enzýmami
|
Sekvenovanie cieľových génov
|
Skríning hostiteľov s vysokou expresiou
|
Skríning hostiteľov s genetickou stabilitou
|
Konzervácia kmeňa
|
Prípadová štúdia
Skonštruovaný Hansenula polymorpha zlepšil výťažok expresie HPV L1 VLP.
Založili sme kvások Hansenula polymorpha (H. polymorpha) inžinierska a skríningová platforma pre expresiu rekombinantných proteínov/peptidov. Po prvé, vygenerovali sme H. polymorpha kmene s nedostatkom proteázy cielenou génovou deléciou. Po druhé, vektor nesúci gén HPV Ll sa transformoval do kompetentných H. polymorpha bunka. Nakoniec preskúmame najlepší klon zo stoviek možností s genetickou stabilitou a vysoko produkčnými vlastnosťami.
Funkcie našich služieb
Preukázali sme odborné znalosti v rôznych mikrobiálnych hostiteľoch, napr. Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink kmeň 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) a Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
Máme skúsenosti s E. coli periplazmatická sekrécia, expresia rozpustných a inklúznych teliesok, ako aj kvasinková intracelulárna alebo sekréčná expresia.
Nepridávame žiadne antibiotiká alebo pridávame antibiotiká podľa regulačných pokynov.
Vytvárame vysokovýkonnú skríningovú platformu na skríning vysoko produkčných a stabilných kmeňov z viac ako sto kandidátskych kmeňov.
Zabezpečujeme, aby bol proces kmeňového inžinierstva a skríningu sledovateľný v rámci Good Data and Record Management.