Yaohai Bio-Pharma ponúka služby testovania sekvencie N-terminálu a analýzy údajov na základe kapalnej chromatografie-maspektrometrie (LC-MS) alebo metódy Edmanovej degradácie, čo vám umožňuje určiť aminokyseliny na príslušných terminách proteínu záujmu. N-termínové úpravy sa tiež dajú analyzovať pomocou LC-MS.
Boli sme zapojení do charakterizácie štruktúry proteínov rôznych veľkých molekúl, vrátane rekombinantných podjednotkových vakcín, nanotěles/VHHs/jednodoménových antitela (sdAbs), fragmentov antitela, hormónov/peptidov, cytokínov, rastových faktorov (GF), enzymov, kolagénov atď.
Regulačné požiadavky pre sekvenovanie N-terminálu
Podľa smerníc ICH Q6B je potrebné potvrdiť sekvenciu vášho proteínu a skontrolovať terminy na prítomnosť akéhokoľvek odchýlenia.
Metódy sekvenovania N-terminálu
Analýza |
Metóda |
N-termínové sekvencovanie |
Edmanova degradácia, Kapalná chromatografia-Maspektrometria (LC-MS) |
Procedúry
LC-MS
1. Fluorescentné označovanie N-terminálu bílkoviny
2. Viacnásobné trávenie
3. Analýza LC-MS / hmotnostná spektrometria (MS)
Edmanova degradácia
1. Elektroforeza v gele s Dodecyl Sulfátom Sódovým (SDS) vášho cieľového bílkoviny
2. Presun gelu na membrány z polyvinylidénfluoridu (PVDF) a odbaravanie
3. Identifikujte a vystrihajte cieľovú pásku bílkoviny
4. Edmanov sekvenovanie N-terminálu
5. Analýza dát