Analýza N-glykosylačnej pozície je kľúčová pre porozumenie funkciám glykanov. Yaohai Bio-Pharma používa kapalinovú chromatografiu - hmotnostnú spektrometriu (LC-MS) po enzymatickom odseknutí pre analýzu N-glykosylačnej pozície.
Boli sme zapojení do charakterizácie štruktúry proteínov rôznych veľkých molekúl, vrátane rekombinantných podjednotkových vakcín, nanotěles/VHHs/jednodoménových antitela (sdAbs), fragmentov antitela, hormónov/peptidov, cytokínov, rastových faktorov (GF), enzymov, kolagénov atď.
Regulačné požiadavky pre N-glykosylačnú pozíciu
Podľa smernice ICH Q6B, „pre glykoproteiny sa určí sacharidový obsah (neutrálny cukor, aminocukory a sialové kyseliny). navyše sa analyzujú štruktúry sacharidových reťazcov, vzor oligosacharidov (antennárny profil) a glykosylačné pozície polypeptidového reťazca v najväčšej možnej miere.
Analytická metóda
Analýza |
Metódy |
Lokalita N-glykosylácie |
Kapalinová chromatografia-maspektrometria (LC-MS) po enzymatickom rozklade |
Procedúry
1. Enzymatické štěpení proteínu pomocou trypsínu alebo iného proteázu
2. Oddeľte glykopetidové fragmenty
3. Potvrďte N-glykosylačnú pozíciu pomocou LC-MS
4. Analyzujte dáta