Všetky kategórie
Príprava proteínov bez tagov

Príprava proteínov bez tagov

Domov >  Mikrobiálne CDMO  >  Výskum a objav  >  Príprava proteínov bez tagov

Príprava proteínov bez tagov

Proteínové značky, ako fúzni partneri používané v technológiách rekombinantnej DNA, umožňujú účinnú jednokrokovú afinitnú purifikáciu pre rôzne proteíny/peptidy s rôznymi charakteristikami. Napriek tejto dôležitej výhode môžu značky ako exogénne aminokyseliny meniť proteínovú štruktúru a biologické funkcie. Preto sú na zaistenie bezpečnosti a účinnosti, najmä v biofarmaceutickej oblasti, výhodnejšie proteíny alebo peptidy bez značiek. Rekombinantný proteín s fúznym tagom má obmedzené možnosti získania povolenia od lekárskych/liečivových agentúr.

Spoločnosť Yaohai Bio-Pharma, založená na platforme výskumu a vývoja v oblasti mikrobiálnej biológie, ponúka prispôsobené služby prípravy proteínov bez značiek (bez značiek) určené na splnenie jedinečných cieľov výskumu, vývoja a výroby na klinické použitie.

Kľúčové slová: produkcia proteínu bez tagov, purifikácia proteínov bez tagov, príprava proteínov na báze voľných tagov, expresia a čistenie proteínov bez tagov, cieľový proteín s vysokým obsahom tagov 

Aplikácia: výskum humánnej medicíny, vývoj živočíšnej medicíny, vývoj rekombinantných vakcín, výroba rekombinantných biologík s veľkou molekulou

Naša platforma mikrobiálneho výskumu a vývoja

Máme skúsenosti s inžinierstvom mikrobiálnych kmeňov, fermentáciou a čistením produktov.

baktérie: Escherichia coli (E. coli)

Kvasinky: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Prispôsobené možnosti
Metóda Rekombinantný proteín
Východiskové materiály Génové sekvencie, rekombinantný plazmid alebo skonštruované kmene
dodávky Čistenie: >80%, >85%, >90% Množstvo: 0.2~10 g (určí sa podľa projektu)
Výrazový systém a formácia

E. coli periplazmatická sekrécia, expresia rozpustných a inklúznych teliesok;

Kvasinková intracelulárna alebo sekréčná expresia

Analytické metódy Ultrafialové (UV), test na kyselinu bicinchonínovú (BCA), Bradford alebo Lowry pre množstvo
Elektroforéza na polyakrylamidovom géli s dodecylsulfátom sodným (SDS-PAGE) na testovanie purifikácie
Voliteľné: Western blot (WB), enzýmová imunoanalýza (ELISA), vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC)
Zvyškové nečistoty Endotoxín (voliteľné)
Detaily služby

Služby

Detaily služby

Minimálna časová os (pracovný deň)

Syntéza génov

Optimalizácia kodónov pre špecifického expresného hostiteľa

7 ~ 10 dni

Syntéza génov

Plazmidová/vektorová konštrukcia

Klonovanie do plazmidu/vektora

2 dní

Transformácia plazmidu

Overenie polymerázovej reťazovej reakcie (PCR), štiepenie reštrikčnými enzýmami, sekvenovanie génov

3 dní

Expresia bielkovín v E. coli

Transformácia plazmidu,

2 dní

Kultivácia v trepačke

3 dní

7L-sacle fermentácia, optimalizácia

4 dni / dávka

Čistenie proteínov bez značiek, optimalizácia

5 ~ 10 dní / dávka

Testovanie elektroforézou na polyakrylamidovom géli s dodecylsulfátom sodným (SDS-PAGE)

Expresia bielkovín v kvasinkách

Príprava kvasinkových kompetentných buniek

4 dní

Linearizácia a elektrotransformácia plazmidu

7L-sacle fermentácia, optimalizácia

5 dní

Čistenie proteínov bez značiek, optimalizácia

7 dní / dávka

Čistenie proteínov bez tagov

5 ~ 10 dní / dávka

QC podľa SDS-PAGE

Doplnkové služby (voliteľné)
Získajte bezplatnú cenovú ponuku

Dostať do kontaktu