Bílkové tagy, ako fúzne partneři používané v technológiách rekombinantnej DNS, umožňujú efektívnu, jednopásmovú afinítu pre rôzne bílkoviny/peptidy s rôznymi vlastnosťami. Navzdory tejto dôležitej výhode môžu tagy ako exogénne aminokyseliny meniť štruktúru bílkovín a ich biologické funkcie. Preto sú neoznačené (beztagové) bílkoviny alebo peptidy viac preferované, aby sa zabezpečila bezpečnosť a účinnosť, osobitne v biofarmaceutickej oblasti. Rekombinantnému bílku s fúziovým tagom má malé možnosti získať povolenie od lekárskych/farmaceutických úradov.
Na základe mikrobiálneho výskumného a vývojového platformy pre biologické lieky ponúka Yaohai Bio-Pharma špeciálne služby na prípravu bílkovín bez tagu (Tag-free), ktoré sú zamerané na splnenie jedinečných cieľov pre výskum, vývoj a výrobu pre klinickú úžitok.
Kľúčové slová: produkcia bílkovín bez tagu, čistenie bílkovín bez tagu, príprava bílkovín na báze voľného tagu, expresia a čistenie bílkovín bez tagu, cieľová bílka vysoce voľná od tagu
Aplikácia: výskum ľudských liekov, vývoj veterinárnych liečiv, vývoj rekombinantných vakcín, produkcia rekombinantných veľkých molekulových biologickej liečiv
Náš mikrobiálny výskumný a vývojový platform
Máme skúsenosti v inžinierstve mikrobiálnych štrien, fermentácii a čistení produktov.
Baktérie: Escherichia coli (E. coli)
Kvasinka: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Prispôsobené možnosti
Modalita |
Rekombinantný proteín |
Výchozí materiály |
Génové sekveny, rekombinantné plazmidy alebo inžinierované štrany |
Výstupy |
Vyčistenie: >80%, >85%, >90% Množstvo: 0.2~10 g (bude určené podľa projektu) |
Výrazový systém a formovanie |
E. coli exprese do periplazmatického priestoru, rozpúšťateľná a inklúzióve tela;
Výraz v kvasinkách - intracelulárne alebo sekretérny
|
Metódy analýzy |
Ultraviolettové (UV), asetát bicinchonínovej kyseliny (BCA), Bradford alebo Lowry na určenie množstva Elektroforeza v polyakrylamidovom geľu so sodíkovou dodecylsulfátovou (SDS-PAGE) pre testovanie čistoty Voliteľné: Western blot (WB), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), vysoko výkonná kapalinová chromatografia (HPLC)
|
Zostávajúce nečistoty |
Endotoxiny (voliteľné) |