Izomerizácia aminokyselín je dôležitou formou posttranslačnej modifikácie (PTM), ktorá ťaží z prebiehajúceho vývoja metódy. Izomerizácia aspartátu je jednou z najbežnejších a najvýznamnejších modifikácií z hľadiska vplyvu na vlastnosti proteínových biofarmaceutík. Kyselina asparágová (Asp) môže ľahko izomerizovať za vzniku kyseliny izoasparágovej (isoAsp). Izomerizácia Asp na izoAsp sa často vyskytuje v bioterapeutikách.
Yaohai-BioPharma ponúka testovaciu službu pre izomerizáciu aminokyselín, ktorá vám umožňuje detekovať a charakterizovať isoAsp pomocou LC-MS.
Boli sme zapojení do proteínovej štrukturálnej charakterizácie rôznych veľkých molekúl, vrátane rekombinantných podjednotkových vakcín, nanobodies/VHH/jednodoménové protilátky (sdAbs), fragmenty protilátok, hormóny/peptidy, cytokíny, rastové faktory (GF), enzýmy, kolagény, atď.
Regulačné požiadavky na izomerizáciu aminokyselín
Podľa smerníc ICH Q6B možno izomerizované formy detegovať a charakterizovať chromatografickými, elektroforetickými a/alebo inými relevantnými analytickými metódami.
Analytické metódy
| Analýza |
Metódy |
| Izomerizácia aminokyselín |
Kvapalinová chromatografia-hmotnostná spektrometria (LC-MS) po enzymatickom štiepení |
Analytické postupy
napr. izomerizácia asparágovej kyseliny
1. Enzymatické štiepenie zvyšku kyseliny asparágovej pomocou endoproteinázy AspN
2. LC-MS a analýza dát na kvantifikáciu pomeru isoAsp/Asp
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
