Analýza miesta N-glykozylácie je rozhodujúca pre pochopenie funkcií glykánov. Yaohai Bio-Pharma používa kvapalinovú chromatografiu-hmotnostnú spektrometriu (LC-MS) po enzymatickom štiepení pre miesto N-glykozylácie.
Boli sme zapojení do proteínovej štrukturálnej charakterizácie rôznych veľkých molekúl, vrátane rekombinantných podjednotkových vakcín, nanobodies/VHH/jednodoménové protilátky (sdAbs), fragmenty protilátok, hormóny/peptidy, cytokíny, rastové faktory (GF), enzýmy, kolagény, atď.
Regulačné požiadavky na miesto N-glykozylácie
Podľa smernice ICH Q6B „pre glykoproteíny sa určuje obsah sacharidov (neutrálne cukry, aminocukry a kyseliny sialové). Okrem toho sa v najlepšom možnom rozsahu analyzuje štruktúra sacharidových reťazcov, oligosacharidový vzor (anténny profil) a glykozylačné miesto (miesta) polypeptidového reťazca.
Analytická metóda
Analýza |
Metódy |
N-glykozylačné miesto |
Kvapalinová chromatografia-hmotnostná spektrometria (LC-MS) po enzymatickom štiepení |
Postupy
1. Enzýmové trávenie proteínu pomocou trypsínu alebo inej proteázy
2. Oddeľte fragmenty glykopeptidov
3. Potvrďte miesto N-glykozylácie pomocou LC-MS
4. Analyzujte údaje