Stanovenie molekulovej hmotnosti pomocou LC-MS
Neporušená molekulová hmotnosť bola vždy uznávaná ako dôležitá charakteristika biologických látok. Analýza neporušenej molekulovej hmotnosti sa používa na demonštráciu proteínových/peptidových produktov a overenie biologických látok. Meranie molekulovej hmotnosti je požiadavka regulačných smerníc.
Yaohai Bio-Pharma ponúka analýzu neporušenej molekulovej hmotnosti za prirodzených, redukovaných, N-deglykozylovaných podmienok. Na stanovenie neporušenej molekulovej hmotnosti používame kvapalinovú chromatografiu-hmotnostnú spektrometriu (LC-MS).
Regulačné požiadavky na molekulovú hmotnosť
V ICH Q6 sa odporúča, aby „molekulová hmotnosť (alebo veľkosť) bola stanovená pomocou vylučovacej chromatografie, elektroforézy na SDS-polyakrylamidovom géli (za redukčných a neredukčných podmienok), hmotnostnej spektrometrie (MS) a iných vhodných techník“.
Analytické metódy
| Analýza |
Metódy |
| Molekulová hmotnosť |
LC-MS/Kvapalinová chromatografia/Elektrosprejová hmotnostná spektrometria (LC/ES-MS) natívnych, redukovaných, N-deglykozylovaných proteínov alebo podjednotiek |
Analytické postupy
Intaktná molekulová hmotnosť:
- Uskutočnenie LC-MS na natívnej vzorke tak, ako bola prijatá.
- LC-MS Analýza dát.
Znížená molekulová hmotnosť:
- Spracovanie vzorky proteínu vhodným redukčným činidlom;
- Uskutočnenie LC-MS na redukovanom proteíne;
- LC-MS Analýza dát.
N-deglykozylovaná molekulová hmotnosť:
- Odstránenie N-glykánov pomocou vhodného enzýmu;
- Uskutočnenie LC-MS na N-deglykozylovanom proteíne;
- LC-MS Analýza dát.
Znížená a N-deglykozylovaná molekulová hmotnosť:
- Spracovanie vzorky proteínu vhodným redukčným činidlom;
- Odstránenie N-glykánov pomocou vhodného enzýmu;
- Uskutočnenie LC-MS na redukovanom a N-deglykozylovanom proteíne;
- LC-MS Analýza dát.
Molekulová hmotnosť proteínovej podjednotky:
- Štiepenie podjednotky
- Uskutočnenie LC-MS na proteínovej podjednotke
- LC-MS analýza dát
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
