Proteázy na odstránenie tagu
Pre zlepšenie rozpustnosti a zjednodušenie procesu čistenia rekombinantných bílkiev výskumníci obvykle pridávajú fúziové tagy, z ktorých sú najčastejšie používané His-tag, maltózovo vázaný protein (MBP) a glutatión-S-transferáz (GST).
Aj keď je tag pridaný ako ďalší sekvenčný úsek bílkoviny, musí byť odstránený, aby sa udržala biologická aktivita v farmaceutickom priemysle. Odstránenie fúziových tagov vyžaduje proteázy so špecifickými lokáciami, ako sú enterokináza (EK), trombín, proteáza tabákového etčivého vírusu (TEVp), proteáza ľudského rínovírusu 3C (HRV3C), proteáza malého ubiquitinového modifikujúceho proteínu (SUMO), proteáza tabákového vírusu s mazanými žilkami (TVMV) a karboxypeptidáza A/B (CPA/CPB).
|
TYP
|
Enzym
|
Pozičný miesto
|
|
Endoproteázy na odstránenie tagu
|
Enterokináza (EK), enteropeptidáza
|
DDDDK↓
|
|
Trombín
|
LVPR↓GS
|
|
TEV proteáza
|
ENLYFQ↓G
|
|
HRV3C proteáza
|
LEVLFQ↓GP
|
|
SUMO proteáza
|
SUMO tersiárna štruktúra
|
|
TVMV proteáza
|
ETVRFQG↓S
|
|
Exoproteázy na odstránenie tagu
|
Carboxypeptidase A (CPA)
|
C-terminálne aminokyseliny, okrem Pro, Lys a Arg
|
|
Carboxypeptidase B (CPB)
|
C-terminálne Lys a Arg
|
Ostatné proteázy
|
APLIKÁCIA
|
Enzym
|
Funkcia
|
|
Ostatné proteázy
|
Proteáza K
|
Serínová proteáza, ktorá trávi proteíny hydrolyzou peptidových väzov.
|
|
IdeS, IgG proteáza
|
Enzymy degradujúce IgG (Ides), ktoré štvú v určitej lokalite imunoglobulínu G (IgG), vyživajúc fragmenty Fab a Fc
|
|
IgA1 proteáza
|
Proteolýticky enzym, ktorý štípa konkrétnu lokalitu v oblasti spojenia (hinge region) ľudského imunoglobulinu A1 (IgA1).
|
Nukleáza
|
APLIKÁCIA
|
Enzym
|
Funkcia
|
|
Nukleáza
|
Nukleáza
|
Štípe nukleové kyseliny (DNA alebo RNA) hydrolyzou fosfodiesterových väzieb.
|
|
Restrikčný enzym
|
Endonukleáza, ktorá štípe DNA v alebo blízko špecifických miest.
|
Amidáza
|
APLIKÁCIA
|
Enzym
|
Funkcia
|
|
Amidáza
|
PNGase F
|
Štípe medzi najvnútornejším GlcNAcom a asparagínovými zvyčkami vysoko manózových, hybridných a komplexných oligosacharidov.
|
Yaohai Bio-Pharma ponúka kompletné CDMO riešenie pre enzymatické reagenty
SK
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
