Všetky kategórie
Minikruh DNA

Minikruh DNA

Domov >  Metóda  >  Nukleové kyseliny  >  Minikruh DNA

Metóda

Minikruh DNA

Minikruhová DNA (mcDNA) je menší nevírusový DNA vektor odvodený od rodičovskej štruktúry podobnej plazmidovej DNA. Minikruhová DNA sa líši od konvenčnej plazmidovej DNA tým, že obsahuje promótor a požadovaný gén (GOI), bez začiatku replikácie (ORI) a selekčného markera (selMark). Minikruhová DNA je produkovaná v baktériách prostredníctvom in vivo rekombinácie na odstránenie extra sekvencií (nazývaných miniplazmid) z plazmidovej DNA. Vďaka svojej bezpečnosti si minikruhová DNA získala popularitu ako nevírusový vektor pre génovú terapiu, DNA vakcíny atď.

图片

Obrázok 1. Štruktúra plazmidovej DNA (pDNA) a minikruhovej DNA (mcDNA)

Minikruhové systémy rekombinácie DNA

Existujú štyri hlavné minikruhové DNA rekombinačné systémy in vivo, ktoré boli študované, vrátane Phage A integrázy, Phage P1 Cre rekombinázy, ParA resolvázy, PhiC31 integra se/I-Scel.

Stratégia

Integráza fága λ

Rekombináza fágu P1 Cre

Resolvase ParA

PhiC31 integra se/I-SceI

Mechanizmus

Tyrozínová rekombináza, ktorá funguje prostredníctvom proteínov FIS a IHF, aby katalyzovala rekombináciu hybridných miest att

Miestovo špecifická tyrozínová rekombináza, ktorá vykonáva obojsmernú rekombináciu pri väzbe na loxP miesta

Serínová rekombináza, ktorá vykonáva ireverzibilnú a jednosmernú rekombináciu medzi dvoma identickými miestami MRS

Serínová rekombináza, ktorá sprostredkováva jednosmernú rekombináciu medzi väzbovými miestami attP/attB, zatiaľ čo endonukleáza I-Scel štiepi nečistoty súvisiace s produktom a nekombinovaný rodičovský plazmid

Vlastnosti

Závisia od expresie hostiteľských faktorov FIS a IHF; vnútorná toxicita; Zvyškový rodičovský plazmid a miniplazmid

Zvyškový rodičovský plazmid a miniplazmid

Vysoký výnos; Zvyškový rodičovský plazmid a miniplazmid

Degradácia rodičovského plazmidu spojená so zníženým výťažkom

Yaohai Bio-Pharma ponúka jednorazové riešenie CDMO pre DNA Minicircle
Referencie:

[1] Almeida AM, Queiroz JA, Sousa F, Sousa Â. Minikruhová DNA: Budúcnosť vektorov založených na DNA? Trends Biotechnol. október 2020;38(10):1047-1051. doi: 10.1016/j.tibtech.2020.04.008.

Získajte bezplatnú cenovú ponuku

Dostať do kontaktu