Kľúčové enzýmy pre produkciu dlhej RNA
mRNA, ako typ dlho kódujúcej RNA, sa počas COVID-19 bezpečne a efektívne prejavovala u širšieho spektra ľudí. Iné dlho kódujúce RNA, ako napríklad samoamplifikujúca RNA (saRNA) a kruhová mRNA (circRNA), tiež preukázali účinnosť v predklinických a klinických štúdiách.
Produkcia dlho kódujúcej RNA vo veľkom meradle závisí od in vitro transkripcie (IVT) prostredníctvom niekoľkých enzymatických reakcií. Kroky produkcie RNA zahŕňajú prípravu templátovej DNA, IVT syntézu RNA, cirkuláciu, odstránenie DNA, modifikáciu RNA (capping a tailing) a purifikáciu RNA.
Existuje niekoľko kľúčových enzýmov používaných pri produkcii RNA s dlhým kódom (napr. mRNA, saRNA a circRNA), vrátane reštrikčných endonukleáz, T7 RNA polymerázy (T7 RNAP), inhibítora RNázy, anorganickej pyrofosfatázy, DNázy I, vaccinia capping enzýmu a RNázy R.
|
Proces
|
Enzým
|
Funkcie
|
|
Príprava DNA šablóny
|
Reštrikčné endonukleázy
|
Linearizácia plazmidovej DNA (pDNA), aby sa zabránilo generovaniu dlhšieho transkriptu.
|
|
Syntéza IVT RNA
|
T7 RNA polymeráza (T7 RNAP)
|
naviazať sa na promótor T7 a vytvoriť špecifický RNA transkript; Hrajte kľúčovú úlohu počas IVT reakcie.
|
|
Inhibítor RNázy, rekombinantný
|
Inhibujte aktivitu RNázy počas IVT reakcie.
|
|
Pyrofosfatáza, Anorganická (iPPáza)
|
Zabráňte pyrofosfátom počas IVT reakcie.
|
|
odstránenie DNA
|
DNáza I
|
Odstráňte šablónu DNA.
|
|
RNA modifikácia
|
Enzým uzatvárajúci vakcíniu
|
Pridajte štruktúry Cap1 na 5' konce IVT mRNA.
|
|
2'-XNUMX-metyltransferas
|
|
obohatenie circRNA
|
RNáza R
|
Strávte lineárnu RNA a obohaťte kruhovú RNA.
|
Yaohai Bio-Pharma ponúka jednorazové riešenie CDMO pre enzýmy
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
