Tedavi Amaçlı Yeniden Birlştirilmiş Enzim
Biyoteknolojik süreçlerle elde edilen tedavi amaçlı enzimler, enzym yerleştirme terapisi, birikmiş metabolitlerin ve zehirin parçalanması, kanser tedavisi ve genom düzenleme gibi birçok klinik uygulamada yaygın olarak kullanılmaktadır. Birçok tedavi amaçlı enzim mikrobiyal ifade sisteminde üretilmesi mümkündür.
Yeniden kombinasyonlu Enzim olarak Malzeme
Uzun kodlama RNA üretimi (örn., mRNA, saRNA, circRNA), antikor–ilac konjukasyonları (ADC'ler) üretimi ve diğerleri için kullanılan birkaç enzim vardır. Mikrobiyal üretilmiş enzimler, özellikle E. coli ifade sistemi, memeli hücrelere göre daha maliyet etkilidir.
|
BAŞVURU
|
Enzimler
|
Fonksiyon
|
|
Doğrusal RNA Üretimi için Enzimler, RNazsız
|
Kısıtlama endonükleazları
|
Plazmid DNA'sının (pDNA) daha uzun bir transkript oluşturmayı önlemek için doğrultulaması.
|
|
T7 RNA polimeraz (T7 RNAP)
|
T7 promotoruna bağlanarak belirli RNA transkriptleri oluşturur; In vitro transkript (IVT) reaksiyonu sırasında anahtar rol oynar.
|
|
Vaccinia kapanma enzimi
|
IVT mRNA'nin 5′ ucuna Kapa yapılarını ekler.
|
|
Pirofostfatase, inorganik (iPPase)
|
IVT reaksiyonu sırasında pirofostatların oluşmasını önler.
|
|
RNaz inhibitörü, rekombinant
|
IVT reaksiyonu sırasında RNaz aktivitesini engeller.
|
|
DNaz I
|
DNA şablonunu kaldırın.
|
|
CircRNA üretimi için enzim, RNase-free
|
Rnase R
|
Doğrusal RNA'yı sindir ve dairesel RNA'ya zenginleştir.
|
|
Enzim destekli glikan konjüksiyonu
|
Peptid-N-glikozidaz (PNGaz F)
|
İlk şeker GlkNAc ve Asn297 yan zinciri arasındaki amid bağından kesme; IgG antikorlarından glikanları serbest bırakma.
|
|
Bakteriyel transglutaminaz (BTG)
|
ADC'ler oluşturmak için yükleri site-özel şekilde konjüke etmek.
|
|
Sortaz A
|
Proteinlerin ligasyonunu kataliz etmek.
|
|
β1,4-galaktosidaz
|
Tüm terminal galaktозleri salır ve antikorun homojen G0 izoformunu oluşturur.
|
|
β1,4-galaktoziltransferaz (Gal-T)
|
Kimyasal olarak reaktif bir fonksiyonel grup içeren bir şeker rezidüsü transfer eder.
|
|
α2,6-sialyltransferaz (Sial T)
|
Terminal sialik asit rezidüslerini bir antikorun yerli glikan yapısına entegre eder.
|
|
Enzim medyasiyle glikan yeniden modelleme ve glyko-mühendisliği
|
Endo-N-asetilglukozaminidaz (ENGase)
|
N-glikanların GlcNAcβ1–4GlcNAc arasındaki β1,4-glikozidik bağları hidrolizer; IgG antikorlarının Fc bölgesindeki N-bağlı glikanları kaldırır.
|
|
Endoglikozidaz S (EndoS)
|
|
|
Glikoziltranzferazlar (GTs)
|
N-glikan oksazolinini defukosilasyon edilmiş IgG'lere aktarır.
|
|
Diğerleri
|
Mikrobiyal ırak tarafından üretilen enzimler
|
Özel tasarım gereksinimi
|
Rekombinant Enzim olarak Reagent
Etiket Kaldırma Proteazları
Füzyon etiketleri, ilgi çekici rekombinant proteinlerin çözünürlüğünü ve kararlılığını artırmak için sıklıkla kullanılır ve bunların ayrıştırılması için daha kolay hale getirilir. En yaygın kullanılan etiketler His-etiketi, maltöz-bağlayıcı protein (MBP), glutation-S-aktarıcı (GST) vb. içerir.
Genellikle, füzyon etiketinin kaldırılması için hedef protein dizisi ile füzyon etiketi arasında bir bağlayıcı dizilim eklenir. Füzyon etiketlerinin kaldırılması, enterokinaz (EK), trombin, tütün erime virüs proteazı (TEVp), insan rinitovirus proteaz 3C (HRV3C), küçük ubiquitin değiştirici protein (SUMO) proteazı, tütün damar lekesi virüs (TVMV) proteazı ve karboksipeptidaz A/B (CPA/CPB) gibi yer-spesifik proteazlara ihtiyaç duyar.
|
TUR
|
Enzimler
|
Tanıma Sitesi
|
|
Etiket kaldırma endoproteazlar
|
Enterokinaz (EK), enteropeptidaz
|
DDDDK↓
|
|
trombin
|
LVPR↓GS
|
|
TEV proteaz
|
ENLYFQ↓G
|
|
HRV3C proteaz
|
LEVLFQ↓GP
|
|
SUMO proteaz
|
SUMO üçüncü yapı
|
|
TVMV proteaz
|
ETVRFQG↓S
|
|
Etiket kaldırma ekoproteazlar
|
Carboxypeptidaz A (CPA)
|
C-terminal amino asitleri, Pro, Lys ve Arg hariç
|
|
Carboxypeptidaz B (CPB)
|
C-terminal Lys ve Arg
|
Diğer Proteazlar, Nükleazlar ve Amidaslar
|
BAŞVURU
|
Enzimler
|
Fonksiyon
|
|
Diğer proteazlar
|
Proteaz K
|
Biytoz bağları hidrolize ederek proteinleri sindiren bir serin proteaz.
|
|
IdeS, IgG proteaz
|
Immunoglobulin G (IgG)'nin belirli bir bölgesinde kesilen ve Fab ve Fc fragmanlarını üreten IgG degradasyon enzimleri (Ides)
|
|
IgA1 proteaz
|
İnsan immunoglobulin A1 (IgA1) kolaylama bölgesi dizisinde belirli bir noktada kesen bir proteolitik enzim.
|
|
Nükleaz
|
Nükleaz
|
Fosfat diyester bağlarını hidrolize ederek nükleik asitleri (DNA veya RNA) keser.
|
|
Restriksiyon enzimi
|
Belirli sitelerde veya yakınında DNA'yı kesen bir endonükleaz.
|
|
Amidaz
|
PNGase F
|
Yüksek mannоз, hibrit ve kompleks oligosakkaritler arasında en içteki N-asetilglukozamin (GlcNAc) ve asparajin kalıntıları arasından keser.
|
Yaohai Bio-Pharma Recombinant Enzimler için Tek Noktada CDMO Çözümü Sunuyor
Kaynak:
[1] Hennigan JN, Lynch MD. Enzim tabanlı terapilerin geçmiş, hal ve gelecek. Drug Discov Today. 2022 Oca;27(1):117-133. doi: 10.1016/j.drudis.2021.09.004.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
