Aşağı Yönde Süreç (DSP) Geliştirmenin Önemi
Fermantasyon sıvı besiyerinin tamamı, hedef protein veya plazmidin yanı sıra ürün ve prosesle ilgili safsızlıklar, örneğin agregatlar, mikrobiyal hücre substratları, Konak Hücre Proteinleri (HCP), Konak Hücre DNA'sı (HCD), endotoksin ve antibiyotikler içerir.
Bu nedenle, belirli safsızlıkları gidermek ve yüksek düzeyde saflaştırılmış ve yüksek kaliteli ilaç maddesi üretmek için etkili bir DSP, saflaştırma süreci tasarlamak çok önemlidir. Ek olarak saflaştırma sürecinin optimizasyonu, ürün geri kazanımını artırmaya, maliyetleri düşürmeye ve süreç ölçeklenebilirliğini ve tekrarlanabilirliğini iyileştirmeye yardımcı olabilir.
Anahtar Kelimeler: süreç geliştirme, optimizasyon ve doğrulama, saflaştırma süreci, kromatografi, safsızlıkların giderilmesi, HCP uzaklaştırılması, HCD eliminasyonu, endotoksin uzaklaştırılması, protein denatürasyonu ve yeniden katlanması, VLP montajı, konjugasyon
Uygulama: Biyofarmasötik endüstrisi, insan ilacı, hayvan ilacı, aşı, rekombinant büyük molekül biyolojikleri, rekombinant biyolojikler, biyolojik reaktif
Yaohai Bio-Pharma'nın DSP Çözümleri
Aşağı yöndeki saflaştırma sürecini geliştirip optimize ederek hedef proteinleri veya plazmitleri karmaşık matrislerden izole etme konusunda kapsamlı deneyime sahibiz. Santrifüjleme, filtrasyon, homojenizasyon, alkalin lizis, ultrafiltrasyon, çökeltme, protein denatürasyonu ve yeniden katlama, kromatografi vb. dahil olmak üzere biyolojik maddelerin saflaştırılması için uygun farklı tipte ünite operasyonları vardır.
Mevcut arıtma geliştirme hizmetlerimiz şunları içerir:
- Hücre veya süpernatan toplanmasından nihai aktif bileşene kadar tüm saflaştırma sürecinin geliştirilmesi.
- Ürün kalitesini ve güvenliğini artırmak için, örneğin HCP, HCD, endotoksin gibi ürün ve prosesle ilgili safsızlıklara dayalı saflaştırma prosesinin optimizasyonu.
- Hücre lizizi, teğetsel akış filtrasyonu, reçine taraması, kromatografi, protein denatürasyonu ve yeniden katlanması vb. dahil olmak üzere bir veya daha fazla ünite operasyonundaki temel parametrelerin tanımı ve optimizasyonu.
- Sürecin kalite, verim, geri kazanım, maliyet ve ölçeklenebilirlik açısından optimizasyonu.
- Aşağı akış saflaştırma işleminin doğrulanması.
- Süreç modellemede risk bazlı parametre aralığı değerlendirmesi ve Deney Tasarımı (DoE).
Servis Detayları
Standartlaştırılmış protein veya plazmid saflaştırma platformları, birden fazla ham saflaştırma adımına ve yakalama, ara saflaştırma ve cilalama dahil olmak üzere 4'ten az kromatografi adımına dayanır.
| Servis Detayları |
Birim İşlemleri |
parametreler |
| Ham Saflaştırma |
santrifüj |
Dönme Hızı, Zaman |
| Yüksek Basınçlı Homojenizasyon |
Toplam Katı Madde İçeriği, Basınç, Döngüler |
| Sürekli Alkali Lizis |
Yeniden Süspansiyona Alınan Hücrelerin Lizis Solüsyonuna Oranı, Lizis Süresi |
| Teğetsel Akış Filtreleme |
Membran Malzemesi ve Gözenek Boyutu, Besleme Akış Hızı Transmembran Basıncı (TMP), Filtrat hacminin membran alanına oranı |
| yağış |
Çöktürücü Tipi ve Konsantrasyonu, Katkı Maddesi, pH, Sıcaklık, Zaman |
| Denatürasyon ve Yeniden Katlama |
İnklüzyon vücut proteininin çözündürülmesi |
Denatüran Konsantrasyonu (örn. Üre, Guanidin HCl, Güçlü İyonik Deterjan), Deterjanlar (örn. Sodyum dodesil sülfat, SDS), İndirgeyici Ajanlar (örn. Ditiyotreitol, DTT), Şelatlayıcı Ajanlar (Etilendiamintetraasetik asit, EDTA), Sıcaklık, Zaman |
| Protein yeniden katlanması |
Yeniden Katlama Yöntemleri (seyreltme, diyaliz veya SEC yeniden katlama), Protein Konsantrasyonları, Tamponlar, pH, Sıcaklık, Zaman, Oksitleyici ve İndirgeyici Ajanlar (örneğin, Glutatyon, GSH/ Oksitlenmiş Glutatyon, GSSH, DTT/GSSH, Sistein/Sistin), Küçük Molekül Katkı Maddeleri (L-arginin, Üre, Guanidin/HCl ve Deterjanlar) |
| Yakalama, Ara Saflaştırma ve Parlatma |
AC (Afinite Kromatografisi) |
Çeşitli kromatografi reçinesi/kolonu türleri (örneğin, AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), Kolon Uzunluğu ve Çapı, Tampon Bileşimi, Enjeksiyon Hacmi, Mobil Faz Bileşimi (Adsorpsiyon ve Desorpsiyon), pH, Akış Hızı, Bağlanma, Yıkama ve Elüsyon Koşulları. |
| IEX (Anyon veya Katyon Değişim Kromatografisi) |
| HIC (Hidrofobik Etkileşim Kromatografisi) |
| Tuzdan arındırma ve/veya boyut dışlama kromatografisi (SEC) |
| RPC (Ters Faz Kromatografisi) |
| MMC, Karışık mod kromatografisi |
Örnek olay
vaka 1
Kromatografi adımlarını azaltırken protein saflığını %85'ten %90'a çıkarmak için aşağı akış saflaştırma sürecini geliştirmek ve optimize etmekle görevlendirildik.
Yaohai, bakteriyel bir alerji olan hedef protein için 3 adımlı kromatografiyle sağlam ve ölçeklenebilir bir saflaştırma süreci sağladı. Ve nihai saflık %95'e ulaştı.
vaka 2
Yaohai, müşterimiz tarafından virüs benzeri parçacık (VLP) aşısının endotoksin giderme sürecini optimize etmek üzere görevlendirildi.
Ekibimiz kromatografi parametrelerinin optimizasyonunu gerçekleştirerek %98 saflıkta ve 12.8EU/mg endotoksin kalıntısına sahip bir ilaç maddesi hazırladı.
Deneyimlerimiz
- Rekombinant alt birim aşılar, VLP'ler, hormonlar (insülin, GLP-1, büyüme hormonu), sitokinler (İnterlökin-2/IL-2, IL-15, IL-21) dahil olmak üzere çeşitli büyük moleküllerin geliştirilmesinde ve üretiminde yer aldık. ), büyüme faktörleri (EGF, FGF, NGF), nanokorlar/tek alanlı antikorlar (sdAb'ler), enzimler vb.
Ekipman
Afinite, iyon değişimi, hidrofobik etkileşim, ters faz ve boyut dışlama kromatografisi dahil olmak üzere çeşitli kromatografi yöntemlerinin performansı için sektör lideri AKTA Pure, AKTA Avant ve Preparative HPLC sistemlerini kullanıyoruz.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
YOK HAYIR
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
