mRNA, gen veya proteın fonksiyonlarının incelenmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Ayrıca, önleyici ve tedavisi biyolojiklerin geliştirilmesinde de yaygdaştır. RNA molekülleri için ortak bir sentez stratejisi olan in vitro transkripsiyon (IVT), bize özelleştirilmiş transkriptleri etkin şekilde elde etme imkanı verir.
Yaohai Bio-Pharma, dizi tasarımı ve optimizasyonu, IVT, temizleme, liofilizasyon ve lipid nano parçacık (LNP) kapsülleme gibi yüksek kaliteli RNA sağlayacak bir dizi mRNA sentezi teknolojisi geliştirmiştir. Tüm ürünler, sıkı kalite kontrolü (QC) standartları altında serbest bırakılır.
2020'de COVID-19 pandemisinin başlamasıyla birlikte, mRNA teknolojisi büyük atılımlar kaydetmiş ve ilgili araştırmalar ile uygulamaları önceden görülmemiş bir kalkışma yaşamıştır; bu da enfeksiyöz hastalıkların önlenmesi için önleyici aşılar, tedavisel kanser aşıları ve ilaçları, tümör tedavisi, protein yer değiştirme terapisi, yenilenimli tıp ve hücre ve gen terapisi (CGT) içermektedir.
mRNA Aşı | mRNA Tedavileri |
|
Süreç | İsteğe Bağlı Hizmet | Hizmet Ayrıntıları | Teslimat Süresi (iş günü) | Teslim Edilecek Ürün |
mRNA dizi tasarımı ve optimizasyonu | Kodlayan dizilerin tasarımı ve optimizasyonu | CDS dizisi tasarımı ve kodon optimizasyonu | 1-3 | Dizi dosyası |
Kodlamayan dizilerin tasarımı ve optimizasyonu | UTR, polyA dizilerinin tasarımı ve optimize edilmesi | |||
Transkripsiyon Şablon Plazmid Hazırlığı | Yeniden kombinant plazmit hazırlığı | Gen sentezi | 7-10 | |
Plazmit amplifikasyonu ve çıkartma | 4 | |||
Plazmit lineerleştirme ve temizleme | ||||
mRNA In Vitro Transkripsiyon | Ko-transkripsiyonel kapatma (tek adımlı yöntem) | In vitro transkripsiyon (IVT) / Kap analogu | 1-2 | N/A |
Nükleotid değişiklikleri (UTP/CTP değişiklikleri) | ||||
DNA şablonu kaldırılması (DNase I) | ||||
Enzimatik başlangıç (iki aşamalı süreç) | IVT | 2-3 | ||
Nükleotid değişiklikleri (UTP/CTP değişiklikleri) | ||||
DNA şablonu kaldırılması (DNase I) | ||||
mRNA temizleme (lityum klorür/manyetik bezel) | ||||
Enzimatik başlangıç | ||||
mRNA Temizleme | Geleneksel temizleme şeması | Lityum klorür birleştirme | 1 | mRNA ilacî madde |
Manyetik bezel temizleme | ||||
Kromatografi sütunu temizleme şeması | Çoklu kromatografi yöntemlerinin kombinasyonu | 1-2 | ||
Tampon değişimi | Ultrafiltrasyon | 1 | ||
mRNA Liofilizasyonu | Liophilizasyon | Ön dondurma | 2-3 | mRNA liophilized tozu |
Birincil kurutma (sublimasyon) | ||||
İkincil kurutma (desorbsiyon) | ||||
mRNA kapsülleme | LNP Kapsülleme | LNP Kapsülleme | 2-3 | mRNA-LNP ilac ürün |
Konsantrasyon ve tampon değişimi | ||||
mRNA Kalite Analizi | mRNA ilac maddeyi / donmuş toz | Konsantrasyon, saflık | 1 | Test raporu |
Bütünlük, kapatma verimliliği, polyA kuyruk dağılımı | 2-5 | |||
mRNA-LNP ilac ürün | Kapsülleme Etkinliği | 1 | ||
Parçacık boyutu ve dağılımı | ||||
Yüzey yükü | ||||
mRNA İfade Doğrulaması | 293T hücre değerlendirmesi | Hücre plajlama | 4 | |
Geçici hücre transfeksiyonu | ||||
Fluoresans sinyali gözlemleri | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Enzim-bağlı immunosorbent analizi (ELISA) |
5' Kap |
▪ Kaplanmamış ▪ Cap0, ortak kaplanmış ▪ Cap1, ortak kaplanmış ▪ Cap1, enzymatik kaplama |
5’ UTR\/3’ UTR |
▪ Doğal UTR dizisi ▪ Mutant/Mühendislik UTR dizisi |
3' PolyA Kuyruğu |
▪ 100A ~120A Kuyruk (önerilen) ▪ Bölünmüş polyA kuyruğu ▪ Diğer özel kuyruklar |
Değiştirilmiş nükleozitler |
▪ Değiştirilmemiş bazlar ▪ Pseudaüridydl (Ψ) ▪ N1-Metilpseudouridin (N1Ψ) ▪ 5-metilцитозин (m5C) ▪ 5-metiluridin (m5U) ▪ 5-metoksiuridin (5moU) ▪ 2-tiyouridin (s2U) ▪ 2′-O-metil-U ▪ Diğer değişiklikler |
Entegrasyonlu Servis Akışı
Ön uç dizaynından arka uca mRNA hazırlığı, kalite kontrolü ve ifade doğrulamasına kadar bir dizi hizmet sunar.
Uluslararası Düzeyde Dizi Tasarımı ve Optimizasyonu
Profesyonel mRNA dizisi tasarımı ve optimizasyonu, etkili mRNA ifadesini kolaylaştırır.
Çeşitli Nükleotid Değişiklikleri
MRNA ifadesini etkili bir şekilde artırır ve mRNA'nın olumsuz immün yanıtlarını azaltır.
Olgun Temizleme Platformu
Geleneksel ve kendinden tasarlanmış bir temizleme yöntemi birleştirilerek, mRNA örnekleri yüksek safte elde edilir.
Tamamlanmış Kalite Kontrol (QC) Platformu
Kalite kontrolü seçeneklerini zenginleştirerek rutin testlerin (örneğin konsantrasyon, A260/280 safliği ve bütünlük) gereksinimlerini karşılayabilirsiniz, aynı zamanda kalpa effektifliği/polyA dağılımı gibi yüksek kalite kontrol gereksinimlerini de sağlayabilirsiniz.
Hızlı teslimat
Dışarıda yapılan dizi sentezi dışında, özelleştirilmiş mRNA 7 gün içinde teslim edilebilir.