Özel saRNA Sentezi
Replikon RNA olarak da bilinen kendi kendini çoğaltan mRNA (saRNA), in vitro transkripsiyon (IVT) mRNA dizilerini ve alfavirüs veya flavivirüslerden türetilen viral replikaz genlerini kodlar. Viral replikaz genleri mRNA'nın kendi kendine amplifikasyonuna izin verir, bu da protein ekspresyonunun artmasına ve amplifiye olmayan mRNA'lara kıyasla gerekli minimum RNA dozuna yol açar. Diğer bir husus ise saRNA'nın nispeten büyük bir molekül olmasıdır (14 kb'den fazla).
Yaohai Bio-Pharma, dizi tasarımı ve optimizasyonu, IVT, saflaştırma, liyofilizasyon ve lipid nanopartikül (LNP) kapsülleme gibi amplifiye olmayan mRNA ve kendi kendini amplifiye eden mRNA (1000 nt~14000 nt) sağlamak için bir dizi mRNA sentez teknolojisi oluşturmuştur. . Tüm ürünler sıkı kalite kontrol standartları altında piyasaya sürülmektedir.
Şekil 1 IVT mRNA'larının Yapısal Özellikleri: Geleneksel, Dairesel ve Kendi Kendini Büyüten mRNA.
Kendi Kendini Büyüten mRNA'nın Dizi Özellikleri
Kendi kendini çoğaltan RNA, Venezüella at ensefaliti virüsü (VEEV) alfavirüslerinden türetilen dört yapısal olmayan proteinden (nsP1, nsP2, nsP3 ve nsP4 olarak adlandırılır) oluşur. Bunlar arasında nsP1, GTase ve N7MTase olmak üzere ikili enzimatik aktiviteler sergilerken nsP2, Cap 0 yapısını oluşturmak üzere IVT mRNA'nın kapatılmasında önemli olan RTPase aktivitesine sahiptir. Ek olarak nsP2, bir proteaz ve helikaz görevi görerek tüm nsP kompleksinin karmaşık işlenmesini kolaylaştırır. NsP3'ün kesin işlevi hala belirsizliğini koruyor, ancak çeşitli konakçı hücre proteinleriyle etkileşime giriyor, böylece konakçı tarafından oluşturulan antiviral tepkinin zayıflamasına katkıda bulunuyor.
Bir alfavirüs subgenomik promoteri (SGP) bölgesi, ilgilenilen genin (GOI) önünde bulunur. SGP elemanı, viral nsP proteinlerini kodlayan dizinin okunmasını atlayarak GOI transkripsiyonunun başlatılmasını kolaylaştırır.
Şekil 2 Yaohai Bio-Pharma RNASci Platformunun eGFP saRNA'sının sentezi ve hücre analizleri.
saRNA'nın Özel Çözümleri
saRNA'nın sentez protokolü mRNA'ya benzer: Özel mRNA Sentezi
- Sıra Tasarımı
- Plazmit Şablonu Hazırlama
- in vitro transkripsiyon (IVT)
- mRNA Enzimatik Kapatma
- mRNA Birlikte Transkripsiyon Sınırlaması
- mRNA Saflaştırma
- mRNA Liyofilizasyonu
- LNP Kapsülleme
- Analiz ve Test
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
YOK HAYIR
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
