Uzun-RNA Üretimi için Anahtar Enzimler
mRNA, COVID-19 sırasında daha geniş bir insan grubunda güvenli ve verimli şekilde çalışmış olan uzun kodlayıcı RNA türlerinden biridir. Self-yenileyen RNA (saRNA) ve dairesel mRNA (circRNA) gibi diğer uzun kodlayıcı RNAlar da ön-klinik ve klinik çalışmalarında etkinlik göstermiştir.
Uzun-kodlayıcı RNA'nın büyük ölçekli üretimi, birkaç enzimatik reaksiyonla gerçekleştirilen in vitro transkripsiyon (IVT) yöntemine dayanır. RNA üretim adımları şunlardır: şablon DNA hazırlığı, IVT RNA sentezi, çoğaltma, DNA kaldırma, RNA değiştirme (kapatma ve kuyruk ekleme) ve RNA temizleme.
MRNA, saRNA ve circRNA gibi uzun kodlayıcı RNA üretiminde kullanılan birkaç anahtar enzim bulunmaktadır, bunlar arasında kısıtlama endonükleazları, T7 RNA polimeraz (T7 RNAP), RNaz inhibitörü, anorganik pirofosfataz, DNaz I, vaksiya kaplama enzimi ve RNaz R bulunur.
|
Süreç
|
Enzim
|
Fonksiyon
|
|
Şablon DNA hazırlığı
|
Kısıtlama endonükleazları
|
Plazmid DNA'sının (pDNA) daha uzun bir transkript oluşturmayı önlemek için doğrultulaması.
|
|
IVT RNA sentezi
|
T7 RNA polimeraz (T7 RNAP)
|
T7 promotoruna bağlanarak belirli RNA transkriptini oluşturur; IVT reaksiyonu sırasında anahtar rol oynar.
|
|
RNaz inhibitörü, rekombinant
|
IVT reaksiyonu sırasında RNaz aktivitesini engeller.
|
|
Pirofostfatase, inorganik (iPPase)
|
IVT reaksiyonu sırasında pirofostatların oluşmasını önler.
|
|
DNA kaldırma
|
DNaz I
|
DNA şablonunu kaldırın.
|
|
RNA değiştirme
|
Vaccinia kapanma enzimi
|
IVT mRNA'nin 5′ ucuna Cap1 yapılarını ekle.
|
|
2’-O-Metiltransferaz
|
|
circRNA zenginleştirme
|
Rnase R
|
Doğrusal RNA'yı sindir ve dairesel RNA'ya zenginleştir.
|
Yaohai Bio-Pharma, Enzimler için Tek Adımda CDMO Çözümü Sunar
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
