Uzun RNA Üretimi için Anahtar Enzimler
Uzun kodlayan bir RNA türü olan mRNA, COVID-19 sırasında daha geniş bir insan yelpazesinde güvenli ve verimli bir şekilde performans gösterdi. Kendi kendini çoğaltan RNA (saRNA) ve dairesel mRNA (circRNA) gibi diğer uzun kodlayan RNA'lar da klinik öncesi ve klinik çalışmalarda etkinlik göstermiştir.
Uzun kodlayan RNA'nın büyük ölçekli üretimi, çeşitli enzimatik reaksiyonlarla in vitro transkripsiyona (IVT) dayanır. RNA üretiminin adımları arasında şablon DNA hazırlığı, IVT RNA sentezi, dolaşım, DNA'nın çıkarılması, RNA modifikasyonu (kapaklama ve kuyruklama) ve RNA saflaştırması yer alır.
Uzun kodlayıcı RNA üretiminde kullanılan (örn. mRNA, saRNA ve circRNA), kısıtlama endonükleazları, T7 RNA polimerazı (T7 RNAP), RNaz inhibitörü, inorganik pirofosfataz, DNaz I, aşı kapaklama enzimi ve RNaz R dahil olmak üzere çeşitli anahtar enzimler vardır.
|
Süreç
|
Enzim
|
işlev
|
|
Şablon DNA hazırlığı
|
Kısıtlama endonükleazları
|
Daha uzun transkript oluşturulmasını önlemek için plazmid DNA'nın (pDNA) doğrusallaştırılması.
|
|
IVT RNA sentezi
|
T7 RNA polimeraz (T7 RNAP)
|
T7 promotörüne bağlanın ve spesifik RNA transkriptini oluşturun; IVT reaksiyonu sırasında anahtar rol oynar.
|
|
RNaz İnhibitörü, rekombinant
|
IVT reaksiyonu sırasında RNase aktivitesini inhibe edin.
|
|
Pirofosfataz, İnorganik (iPPase)
|
IVT reaksiyonu sırasında pirofosfatı önleyin.
|
|
DNA çıkarma
|
DNaz I
|
DNA şablonunu çıkarın.
|
|
RNA modifikasyonu
|
Vaccinia kapatma enzimi
|
IVT mRNA'nın 1' uçlarına Cap5 yapıları ekleyin.
|
|
2'-O-Metiltransferler
|
| circRNA zenginleştirmesi |
RNaz R |
Doğrusal RNA'yı sindirin ve dairesel RNA'yı zenginleştirin. |
Yaohai Bio-Pharma Enzimler için Tek Noktadan CDMO Çözümü Sunuyor
TR
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
YOK HAYIR
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
