Gerinim Taramasının Önemi
Ürünün ve üretim sürecinin kalitesini ve tutarlılığını belirleyen biyolojik CMC gelişimi için uygun konakçıların taranması gereklidir. Konakçı taramasının doğrudan amacı, hem geçiş stabilitesi hem de depolama stabilitesi açısından yüksek ekspresyon seviyelerine ve yüksek stabiliteye sahip bir aday birincil hücre bankası (PCB) sağlamaktır. Uygun konağın taranması iki ana nedenden dolayı gereklidir:
- İlk olarak ekspresyon seviyesi yüksek olan mikrobiyal konağın seçilmesi. Toksik proteinler, çözünebilir proteinler veya ökaryotik proteinler gibi farklı protein türlerini ifade etmek için kullanılan, ticari olarak temin edilebilen çok sayıda suş vardır.
- İkincisi, genetik stabilitesi olan konağı taramak. Genetik stabilite testi, üretim yaşam döngüsü boyunca önemli bir noktadır. Yüksek genetik stabilitenin, uygun suş için başka bir temel özellik olarak kabul edildiği öne sürülmektedir.
Anahtar Kelimeler: mikrobiyal suş seçimi, mikrobiyal suş taraması, bakteri veya mayanın yüksek verimli taranması, yüksek üreten suş taraması, yüksek stabiliteye sahip suş taraması, genetik stabil suş taraması Uygulama: insan tıbbı, hayvan tıbbı, aşı, sentetik biyoloji, rekombinant büyük molekül biyolojik, biyolojik reaktif
Yaohai Bio-Pharma'nın Tür Tarama Hizmetleri
Mikrobiyal biyolojik ürünlerdeki 10 yılı aşkın CDMO deneyimimizden yararlanarak, rekombinant alt birim aşılar, virüs benzeri parçacıklar (VLP), hormonlar (insülin, GLP-1, büyüme hormonu), sitokinler dahil olmak üzere çeşitli büyük moleküllerin geliştirilmesini ve üretimini destekliyoruz ( İnterlökin-2/IL-2, IL-15, IL-21), büyüme faktörleri (EGF, FGF, NGF), nanokorlar/Tek alanlı antikorlar (sdAb'ler), enzimler vb.
Bakteriler de dahil olmak üzere çeşitli plazmid vektör türlerinin ve mikrobiyal konakçıların seçiminde zengin deneyimler biriktirdik. Escherichia coli (E. coli), ve maya Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Benzersiz biyolojikleriniz için en iyi ifade sistemini bulabiliriz.
Açık kaynaklara ve standart CoA'ya sahip çeşitli mikrobiyal konakçıları topladık. E.coli ifade ve maya ifadesi.
Servis Detayları
Hizmetler
|
Servis Detayları
|
Minimum Zaman Çizelgesi/Gün
|
Teslim
|
Tür Yapısı (E. coli)
|
Plazmid dönüşümü (çoklu konakçı)
|
5
|
Ticari konakçıların COA'sı Gerinim yapım raporu
|
PCR doğrulaması
|
Gerilme saflaştırması
|
Gerilme koruması
|
Gerilme Yapısı (Maya)
|
Yetkili maya hücrelerinin hazırlanması
|
10
|
Plazmid doğrusallaştırma
|
Elektro dönüşüm
|
Direnç/Beslenme eksikliği taraması
|
Gerilme saflaştırması
|
Gerilme koruması
|
Uygun Konak Taraması
|
Plazmid veya Genom DNA ekstraksiyonu
|
15-20
|
Tasarlanmış suşların konakçı tarama süreciCOA'sı
|
PCR doğrulaması, kısıtlama enzimi sindirimi
|
Hedef gen dizilimi
|
Yüksek ifadeli konakçıların taranması
|
Genetik stabiliteye sahip konakçıların taranması
|
Gerilme koruması
|
Örnek olay
Uygun bir konakçı, protein ekspresyon seviyesini 2.5 kat artırır.
Yüksek üreten ürünler geliştirmek için görevlendirildik E. coli gerilmek. Ve üç tür reklam denedik E. coli Hedef proteinin özelliklerine göre konakçılar. S1-1 ve S1-2 suşunun (Şekil A: Şerit 1,2), protein seviyesini müşterinin başlangıçtaki suşuna göre 3.5 kat arttırdığı gösterilmiştir (Şekil A: Şerit 3).
Ayrıca S1-1 suşu yüksek genetik stabilite gösterdi (Şekil B) ve birincil hücre bankacılığı (PCB) için aday suş olarak kabul edildi.
Hizmet Özelliklerimiz
Çeşitli mikrobiyal konakçılar konusunda kanıtlanmış uzmanlık, örneğin, E. coli DH5a, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink suşu1/2/3/4; S. cerevisiae ve H. polimorfa.
konusunda tecrübeliyiz E. coli periplazmik sekresyon, çözünebilir ve inklüzyon cisimciği ekspresyonunun yanı sıra maya hücre içi veya salgı ekspresyonu. Hiçbir antibiyotik eklemiyoruz veya antibiyotikleri mevzuatın rehberliği altında ekliyoruz.
Yüzün üzerinde aday suştan yüksek verimli ve stabil suşları taramak için yüksek verimli bir tarama platformu oluşturuyoruz.
İyi Veri ve Kayıt Yönetimi kapsamında gerinim mühendisliği ve tarama sürecinin izlenebilir olması sağlanır.