N-glikozilasyon sit ocypansy, glikoproteinlerin bir fiziolojik özelliği ve ana olarak N-glikan üretir. Yaohai Bio-Pharma'nın N-glikozilasyon sit ocypansy analizi hizmeti, sıvı kromatografi-elektrospray iyonizasyon kütle spektrometresi-kütle spektrometresi (LC-ESI-MS/MS) kullanılarak sindirim, salım, zenginleştirme ve analiz yoluyla gerçekleştirilir.
Çeşitli büyük moleküllerin Protein Yapısal Karakterizasyonu konusunda çalıştık, bunların arasında Rekombinant Alt Birim Aşılar, Nanovüçgenler/VHH'ler/ Tek-domän Antikorlar (sdAbs), Antikor Parçaları, Hormonlar/Peptidler, Sito kinler, Büyüme Faktörleri (GF), Enzimler, Kolajenler vb. bulunur.
N-glikozilasyon Sit Ocupancy için Düzenleyici Gereksinimler
ICH Q6B rehberine göre, "glikoproteinler için karbonhidrat içeriği (nötr şekerler, amino şekerleri ve sialik asitler) belirlenir. Ayrıca, karbonhidrat zincirlerinin yapısı, oligosakkarit deseni (anten profili) ve polipeptid zincirinin glikozilasyon sitesi(leri) mümkün olan en iyi şekilde analiz edilir."
Analitik Yöntem
| Analiz |
Yöntemler |
| N-glikozilasyon Sit Bağlanma Oranı |
Deglisilikaz ve proteaz sindiriminden sonra LC-MS |
İşlemler
1. Küçük peptit parçacıkları oluşturmak için proteinlerin sindirilmesi.
2. Endoglisidas H veya PNGase F kullanılarak N-glikanın serbest bırakılması. Endoglisidas H, N-bağlı glikanların çekirdeğindeki iki GlcNAc rezidüsündeki bağları keserken, PNGase F, GlcNAc ve Asn arasındaki bağı keserek tüm şeker zincirini serbest bırakır ve Asn'ı 1-Da artan kütleye sahip Asp'e dönüştürür.
3. HILIC (Hidrofob İlişkisel Sıvı Kromatografi) ile N-glikopeptid zenginleştirme
4. N-bağlı glikozilasyon site meşguliyetinin LC-ESI-MS/MS kullanılarak analizi.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
