Disulfide bağları bazen S-S bağları veya disulfide köprüleri olarak adlandırılır. Disulfide köprüleri, peptitler, proteinler ve antijenler gibi biyolojiklerin biyoaktifliğini etkiler.
Yaohai Bio-Pharma, sıvı kromatografi-mass spektrometri (LC-MS) temelli disulfide bağları analizi hizmetleri sunmaktadır.
Çeşitli büyük moleküllerin Protein Yapısal Karakterizasyonu konusunda çalıştık, bunların arasında Rekombinant Alt Birim Aşılar, Nanovüçgenler/VHH'ler/ Tek-domän Antikorlar (sdAbs), Antikor Parçaları, Hormonlar/Peptidler, Sito kinler, Büyüme Faktörleri (GF), Enzimler, Kolajenler vb. bulunur.
Disulfide Bağları İçin Düzenleyici Gereksinimler
Farklı biyolojiklerde farklı sayıda ve yapıda disulfide köprüleri bulunur ve ürünün beklenen birincil amino asit dizisi cystein içeriyorsa, bu köprüler protein karakterizasyon çalışması sırasında tamamen değerlendirilmelidir. Bu aynı zamanda ICH Konu Q6B düzenleyici belgesinden de talep edilir.
Analitik Yöntemler
Analiz |
Yöntemler |
Disülfür Bağları |
Sindirim sonrası Likid Kromatografi-Mass Spektrometri (LC-MS) |
Disülfid köprüleri ve serbest tiyollerin tam değerlendirmesi için gerekli tüm verileri elde etmek amacıyla, Yaohai Bio-pharma bilim adamları belirli bir proteaz ile sindirim sonrası peptid haritalaması yapar. Daha sonra, indirgeme öncesi ve sonrası için çevrimiçi LC/Elektrospray Ionizasyon Mass Spektrometri (ES-MS) ve/veya LC/ES-MS/MS kullanılarak analiz yapılır.
Yaohai Bio-pharma, sistein içeren herhangi bir ürünün tam değerlendirmesinin önemli bir parçası olan Ellman testini de gerçekleştirebilir. Ellman testi kapsamında, sulfhidril gruplarını (5,5’-ditiyo-bis-[2-nitrobenzoik asit]) kullanarak türevleştirmektedir. Serbest tiyol seviyelerini belirlemek için elde edilen ürün, 412nm'de UV spektrofotometri ile analiz edilir.