CircRNA hazırlığı, siklizasyon için (RNA öncüsü) olarak lineer RNA'yı öncü malzeme olarak gerektirir; burada RNA öncüsü genellikle lineerleştirilmiş plazmid DNA'sını bir transkripsiyon şablonu olarak kullanarak hazırlanır ve T7 RNA polimeraz yardımıyla vücut dışı transkript edilir.
Vücut dışı transkripsiyon (IVT) için yüksek kaliteli plazmid DNA'nın kullanılması çok önemlidir. Olgun plazmid hazırlama hizmeti platformuna dayanarak, Yaohai Bio-Pharma, IVT ürünlerinin bütünlüğünü sağlamak için yüksek saflikta ve standart lineerleştirilmiş plazmid DNA (pDNA) hazırlama hizmeti sunabilir.
Hizmetler Detayları
| Süreç |
İsteğe Bağlı Hizmet |
Hizmet Ayrıntıları |
Teslimat Süresi (iş günü) |
| Dairesel Plazmid Hazırlama |
Gen sentezi |
Gen Sentezi (Üçüncü taraf) |
7-10 |
| Plazmid Yükseltme |
Plazmid Yükseltme |
2 |
| Plazmid Çıkartma |
| Doğrusal Plazmid Hazırlığı |
Plazmit lineerleştirme ve temizleme |
Plazmid doğrusallaştırma |
1 |
| DNA Doğrusallaştırma ve Temizleme |
| Plazmid DNA kalite kontrolü |
Konsantrasyon saflık |
Ultraviyole (UV) Spektrofotometri |
1-2 |
| Plazmid konformasyonu |
Agaroz Jeli Elektroforezi (AGE) |
| Kapiler Elektroforesi (CE)-İsteğe Bağlı |
| Plazmid Tanımlama |
Kısıtlama enzimi tanımlama / AGE |
Özelliklerimiz
Doğrusallaştırma yöntemlerinin esnek seçimi
Yüksek kurtarma oranına ulaşmak için DNA çıkarma ve temizleme yöntemlerinin optimizasyonu.
Süperheliksid konformasyon oranı %80'den fazla olan plazmid örnekleri için araştırmacı düzeyinde kesin süreç kontrol standartları.
Deney gereksinimlerini karşılamak için yüksek standartlı ve verimli plazmid hazırlama ve kalite kontrol hizmetleri.
Durum İncelemesi
Yaohai Bio-Pharma ürün mCherry circRNA'sını örnek alarak, transkripsiyon şablonu plazmid örneklerinin (araştırma sınıfı) süperkatlenme oranı %70'ten fazla olup, doğrusallaştırma oranı neredeyse %100'dür.
mCherry circRNA, doğrusallaştırılmış plazmid şablonu ile hazırlanır ve 293T hücrelerine transfeksiyon edilir. Transfeksiyonun 24 saat sonra yüksek seviyede fluoresans ifadesi (kırmızı fluoresans) tespit edilir, bu durum 48 saat sonra artar ve transfeksiyonun yedinci ve on dördüncü gününde hala tespit edilebilir.
mCherry protein stabil ve verimli bir şekilde ifade edilir ve transkripsiyonel şablon safliği, yüksek kaliteli circRNA ilaç ürününün (DP) gereksinimini karşılayabilir.
MCherry circRNA'nın in vitro ifade doğrulaması
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
