A hepatite C é uma doença do fígado causada pelo vírus da hepatite C (HCV), que é transmitido através do sangue de uma pessoa infectada. Globalmente, estima-se que 58 milhões de pessoas estejam infectadas com o vírus da hepatite C, com cerca de 1.5 milhões de novos pacientes todos os anos. A hepatite C crónica infecta cerca de 3.2 milhões de jovens e pode causar hepatite aguda e crónica, que pode incluir uma doença ligeira e uma doença grave e duradoura, como cirrose hepática e cancro (carcinoma hepatocelular e linfomas). Diferentemente das hepatites A e B, atualmente não existe vacina para o vírus da hepatite C.
Sendo um vírus pequeno, envelopado e de sentido positivo de RNA de cadeia simples (ssRNA) pertencente à família Flaviviridae, a partícula do vírus da hepatite C compreende um envelope de membrana lipídica com 55 a 65 nm de diâmetro.
O genoma do HCV é constituído por um único quadro de leitura aberto cujo comprimento é de 9600 bases de nucleotídeos; as proteínas estruturais do HCV são a proteína central, as proteínas do envelope E1 e E2, e as proteínas não estruturais contêm NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A e NS5B. As proteínas do vírus são gerenciadas na seguinte ordem ao longo do genoma: N terminal-antígeno central (HCVcAg) -E1 – E2 – p7- NS2 – NS3 – NS4A – NS4B – NS5A – NS5B – terminal C.
Antígeno Central do HCV (HCVcAg)
Sendo uma fosfoproteína estrutural da cápside do HCV, o antígeno central do HCV (HCVcAg) consiste nos primeiros 191 aminoácidos da poliproteína viral. O antígeno central do vírus da hepatite C é altamente preservado em todos os genótipos do HCV. Eles estão presentes em todo o vírus e em construções de proteínas centrais livres de RNA.
Proteínas do Envelope (E1 e E2)
E1 e E2 são duas glicoproteínas do envelope viral incorporadas no envelope lipídico. Ambos são responsáveis pela fixação viral e entrada nas células. Dentro do envelope há um núcleo icosaédrico com diâmetros de 33-40 nm.
Proteínas Não Estruturais
Como uma proteína que atravessa a membrana de 63 aminoácidos, a proteína NS1 (p7) desempenha um papel importante na morfogênese do vírus. NS2 é uma proteína transmembrana com atividade de protease e NS3 é uma proteína de 67 kDa com atividade de serina protease no terminal N e constitui um complexo heterodimérico com NS4A, que serve como cofator de proteinase. A NS4B é essencial para o recrutamento de outras proteínas virais. A NS5A, como uma fosfoproteína hidrofílica, é crucial para a replicação viral, modulação das vias de sinalização celular e resposta do interferon. A proteína NS5B é uma RNA polimerase dependente de RNA.
Aplicação de antígenos de HCV
Existem antígenos do HCV para serem aplicados em testes de anticorpos anti-HCV para detecção de anticorpos contra o HCV no sangue. O teste de anticorpos anti-HCV com teste sorológico identifica pacientes infectados com o vírus. O ensaio Anti-HCV foi concebido para detectar dadores humanos, tais como dadores voluntários de sangue total e componentes sanguíneos, e outros dadores vivos quanto à presença de anti-HCV.
Kit de reagentes PRISM HCV
O ensaio ABBOTT PRISM HCV é usado para detecção qualitativa de anticorpos contra o vírus da hepatite C (anti-HCV) em amostras de soro e plasma humano, sendo um imunoensaio quimioluminescente in vitro (ChLIA). O kit contém antígenos recombinantes, incluindo proteínas centrais e proteínas não estruturais (NS3, NS4 e NS5), podendo, portanto, ser aplicado para detectar anticorpos contra esses antígenos.
A proteína HCr43 é uma proteína de fusão que consiste na proteína central do HCV e na região não estrutural 3 do HCV (NS3) expressa em Escherichia coli (E. coli).
A proteína c100-3 é expressa em Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) como uma proteína de fusão de NS3, NS4 e superóxido dismutase (SOD).
A proteína de fusão NS5-SOD também é expressa em Saccharomyces cerevisiae.
Kit de reagentes anti-HCV da Alinity
Como outro kit para teste anti-HCV no Sistema Alinity, o ensaio Alinity Anti-HCV consiste em antígenos recombinantes derivados do HCV (c100-3, HCr43) fabricados em E. coli e fermento. O ensaio Alinity Anti-HCV destina-se à detecção de anticorpos contra a proteína central, regiões NS3 e NS4 do genoma do HCV.
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