Síntese personalizada de circRNA

RNA IVT

Síntese personalizada de circRNA

O mRNA circular (circRNA) tem sido amplamente utilizado no estudo das funções de genes ou proteínas. Ao mesmo tempo, é popular no desenvolvimento de biológicos preventivos e terapêuticos, semelhante ao mRNA.

A Yaohai Bio-Pharma desenvolveu um conjunto de tecnologias de síntese de circRNA para fornecer RNA de alta qualidade, como design e otimização de sequências, transcrição in vitro (IVT), ciclização, purificação e encapsulamento em nanopartículas lipídicas (LNP). Todos os produtos são liberados sob padrões rigorosos de controle de qualidade (QC).

Aplicações de circRNA

Em comparação com o mRNA linear, o RNA circular (circRNA) é mais estável em estrutura e é um grande ponto quente na pesquisa atual de medicamentos de ácido nucleico. Ele tem uma ampla gama de aplicações em diferentes campos, seja como circRNA codificante ou não codificante, incluindo vacinas preventivas para doenças infecciosas, vacinas oncológicas terapêuticas, medicamentos oncológicos terapêuticos, terapia de reposição de proteínas, medicina regenerativa, terapia celular e genética (CGT), função de esponja molecular e aptâmeros de RNA.

Detalhes do Serviço

Processo	Serviço Opcional	Detalhes do Serviço	Prazo de Entrega (Dias)
design e Otimização de Sequências de circRNA	Design e otimização de sequências codificantes	Otimização de codons CDS	1
design e Otimização de Sequências de circRNA	Design e otimização de sequências não codificantes	Design e Otimização de Sequências de Introns e Exons, Braços Homólogos e Espaçadores	1-2
Preparação de Plasmídeo Circular	Síntese de genes	Síntese de Gene (Terceiros)	7 a 10
	Amplificação de Plasmídeo	Amplificação de Plasmídeo	2
	Amplificação de Plasmídeo	Extração de Plasmídeo	2
Preparação de Plasmídeo Linearizado	Linearização e purificação de plasmídeos	Linearização de plasmídeo	1
Preparação de Plasmídeo Linearizado	Linearização e purificação de plasmídeos	Purificação de DNA Linearizado	1
Transcrição in Vitro e Ciclização	Transcrição in Vitro e Ciclização	Reações de Transcrição in Vitro e Ciclização	1-2
	Transcrição in Vitro e Ciclização	Digestão com RNase R	1-2
	Otimização-opcional	Composição da Reação, Otimização de Tempo	2-5
purificação de circRNA	Método Convencional de Purificação	Precipitação com cloreto de lítio	1
	Método Convencional de Purificação	Purificação com ímãs magnéticos	1
	Purificação altamente Pura de circRNA	Cromatografia Líquida de Alto Desempenho (HPLC) Preparativa	1-2
	Troca de tampão	Ultrafiltração	1
liofilização de circRNA	Preenchimento de Amostra	Enchimento	2-3
	Liofilização	Pré-congelamento
		Secagem primária (sublimação)
		Secagem secundária (dessorção)
encapsulamento de circRNA-LNP	Encapsulamento em LNP	Pretreamento de Material e Líquido	2
	Encapsulamento em LNP	Mistura em Dispositivo Microfluídico	2
	Troca de tampão	Filtragem por Fluxo Tangencial	1
	Estéril	Filtração	1
Controle de Qualidade de DNA de Plasmídeo	Concentração/pureza	Espectrofotometria Ultravioleta (UV)	1-2
	Conformação de plasmídeo	Eletroforese em Gel de Agarose (AGE)
	Conformação de plasmídeo	Eletroforese Capilar (CE) - Opcional
	Identificação de Plasmídeo	Identificação de Enzima de Restrição/AGE
Controle de Qualidade de circRNA	Concentração/pureza	Espectrofotometria Ultravioleta (UV)	-
	Purificação	Eletroforese em Gel de Agarose (AGE)/E-Gel	0.5
	Purificação	HPLC - Opcional	1
Controle de Qualidade de circRNA-LNP	Eficiência de Encapsulamento	Método RiboGreen	1
	Tamanho de Partícula	Difusão Dinâmica da Luz (DLS)	1
	Índice de Polidispersidade	Difusão Dinâmica da Luz (DLS)	1
	Potencial zeta	Difusão Dinâmica da Luz (DLS)	1
Ensaio de potência baseado em células	Transfecção celular	Placa de células, transfecção celular	4
Ensaio de potência baseado em células	Detecção de proteína alvo	Observação por fluorescência, Western Blot/ELISA	1-3

Estudo de Caso

Transfetamos circRNA de proteína fluorescente verde aprimorada (eGFP circRNA), mCereja circRNA, luciferase circRNA em células 293T e detectamos a proteína alvo através de sinais de fluorescência, luminescência ou cor, western blot (WB), ensaio imunoenzimático ligado (ELISA).

Ensaios de Potência Baseados em Células de Amostras circRNA pela Yaohai Bio-Pharma

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