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Preparação de proteínas sem etiqueta

Preparação de proteínas sem etiqueta

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Preparação de proteínas sem etiqueta

Os marcadores de proteína, como parceiros de fusão usados ​​em tecnologias de DNA recombinante, permitem uma purificação de afinidade eficaz e em uma única etapa para várias proteínas/peptídeos com características diferentes. Apesar desta importante vantagem, marcadores como aminoácidos exógenos podem alterar a estrutura proteica e as funções biológicas. Portanto, proteínas ou peptídeos não marcados (sem marcação) são mais preferidos para garantir segurança e eficácia, especialmente no campo biofarmacêutico. Uma proteína recombinante com uma etiqueta de fusão tem possibilidades limitadas de obtenção de autorização de agências de administração médica/de medicamentos.

Com base na plataforma de P&D de produtos biológicos microbianos, a Yaohai Bio-Pharma oferece serviços personalizados de preparação de proteínas sem etiqueta (sem etiqueta), dedicados a atender objetivos exclusivos de pesquisa, desenvolvimento e fabricação para uso clínico.

Palavras-chave: produção de proteína livre de etiqueta, purificação de proteína não marcada, preparação de proteína baseada em etiqueta livre, expressão e purificação de proteína sem etiqueta, proteína alvo altamente livre de etiqueta 

Aplicação: pesquisa em medicina humana, desenvolvimento de medicina animal, desenvolvimento de vacinas recombinantes, produção de produtos biológicos de moléculas grandes recombinantes

Nossa plataforma de pesquisa e desenvolvimento microbiano

Temos experiência em engenharia de cepas microbianas, fermentação e purificação de produtos.

Bactérias: Escherichia coli (E. coli)

Fermento: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Opções personalizadas
Modalidade Proteína Recombinante
Materiais iniciais Sequências genéticas, plasmídeos recombinantes ou cepas modificadas
Entregas Purificar: >80%, >85%, >90% Quantidade: 0.2~10 g (a ser determinado pelo projeto)
Sistema de Expressão e Formação

E. coli secreção periplasmática, expressão de corpos solúveis e de inclusão;

Expressão intracelular ou de secreção de levedura

Métodos de análise Ensaio de ácido ultravioleta (UV), bicinconínico (BCA), Bradford ou Lowry para quantidade
Eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil-sulfato de sódio (SDS-PAGE) para testes de purificação
Opcional: Western blot (WB), ensaio imunoenzimático (ELISA), cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC)
Impurezas residuais Endotoxina (opcional)
Detalhes de serviços

Serviços

Detalhes de serviços

Cronograma Mínimo (dia útil)

Síntese genética

Otimização de códon para host de expressão específico

7 ~ dia 10

Síntese genética

Construção de plasmídeo/vetor

Clonagem em plasmídeo/vetor

2 dias

Transformação de plasmídeo

Verificação da reação em cadeia da polimerase (PCR), digestão com enzimas de restrição, sequenciamento genético

3 dias

Expressão proteica em E. coli

Transformação de plasmídeo,

2 dias

Cultivo em frasco shake

3 dias

Fermentação saca 7L, otimização

4 dias/lote

Purificação e otimização de proteínas sem tags

5~10 dias/lote

Teste por eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil-sulfato de sódio (SDS-PAGE)

Expressão proteica em levedura

Preparação de células competentes de levedura

4 dias

Linearização de plasmídeos e eletrotransformação

Fermentação saca 7L, otimização

5 dias

Purificação e otimização de proteínas sem tags

7 dias/lote

Purificação de proteínas sem etiqueta

5~10 dias/lote

CQ por SDS-PAGE

Serviços Adicionais (Opcional)
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