A análise do sítio de N-glicosilação é crucial para entender as funções dos glicanos. A Yaohai Bio-Pharma utiliza Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa (LC-MS) após clivagem enzimática para o sítio de N-glicosilação.
Estivemos envolvidos na Caracterização Estrutural de Proteínas de várias grandes moléculas, incluindo Vacinas Recombinantes de Subunidades, Nanocorpos/VHHs/ Anticorpos de Domínio Único (sdAbs), Fragmentos de Anticorpos, Hormônios/Peptídeos, Citocinas, Fatores de Crescimento (GF), Enzimas, Colágenos, etc.
Requisitos Regulatórios para Sítio de N-Glicosilação
De acordo com a diretriz ICH Q6B, “para glicoproteínas, o teor de carboidratos (açúcares neutros, amino açúcares e ácidos siálicos) é determinado. Além disso, a estrutura das cadeias de carboidratos, o padrão de oligossacarídeos (perfil antennário) e os sítios de glicosilação da cadeia polipeptídica são analisados na maior extensão possível.
Método Analítico
| Análise |
Métodos |
| Sítio de N-glicosilação |
Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa (LC-MS) após clivagem enzimática |
Procedimentos
1. Digestão enzimática da proteína usando tripsina ou outra protease
2. Separe glicopeptídeos de fragmento
3. Confirme o sítio de N-glicosilação por LC-MS
4. Analise os dados
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