Yaohai Bio-Pharma oferece serviços de teste de sequenciamento N-terminal e análise de dados com base em Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa (LC-MS) ou método de degradação de Edman, que permite determinar os aminoácidos nos terminais correspondentes da proteína de interesse. A modificação N-terminal também pode ser analisada por LC-MS.
Estivemos envolvidos na Caracterização Estrutural de Proteínas de várias grandes moléculas, incluindo Vacinas Recombinantes de Subunidades, Nanocorpos/VHHs/ Anticorpos de Domínio Único (sdAbs), Fragmentos de Anticorpos, Hormônios/Peptídeos, Citocinas, Fatores de Crescimento (GF), Enzimas, Colágenos, etc.
Requisitos Regulatórios para Sequenciamento N Terminal
De acordo com as diretrizes ICH Q6B, é necessário confirmar a sequência da sua proteína e examinar os terminais quanto a qualquer variação que possa existir.
Métodos de Sequenciamento N Terminal
| Análise |
Método |
| Sequenciamento do Terminal N |
Degradção de Edman, Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa (LC-MS) |
Procedimentos
LC-MS
1. Marcagem fluorescente do termino N da proteína
2. Múltiplas digestões
3. Análise por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa (LC-MS/MS)
Degradção de Edman
1. Eletroforese em gel de Sulfato de Dodecila de Sódio (SDS) da sua proteína alvo
2. Transferência do gel para membranas de Fluoreto de Polivinilideno (PVDF) e coloração
3. Identificar e recortar a banda da proteína alvo
4. Sequenciamento de Edman do termino N
5. Análise de dados
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