o mRNA tem sido amplamente utilizado no estudo de funções gênicas ou proteicas. Ao mesmo tempo, é comum no desenvolvimento de biológicos preventivos e terapêuticos. Como uma estratégia comum de síntese de moléculas de RNA, a transcrição in vitro (IVT) nos permite obter transcritos personalizados de forma eficiente.
A Yaohai Bio-Pharma desenvolveu um conjunto de tecnologias de síntese de mRNA para fornecer RNA de alta qualidade, como design e otimização de sequências, IVT, purificação, liofilização e encapsulamento em nanopartículas lipídicas (LNP). Todos os produtos são liberados sob rigorosos padrões de controle de qualidade (QC).
Com o surto da pandemia de COVID-19 em 2020, a tecnologia de mRNA avançou exponencialmente, e suas pesquisas e aplicações relacionadas alcançaram um desenvolvimento sem precedentes, incluindo vacinas preventivas para a prevenção de doenças infecciosas, vacinas terapêuticas oncológicas e medicamentos, terapia tumoral, terapia de substituição de proteínas, medicina regenerativa e terapia celular e genética (CGT).
vacina de mRNA | terapias de mRNA |
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Processo | Serviço Opcional | Detalhes do Serviço | Prazo de Entrega (dia útil) | Entregável |
design e Otimização de Sequências de mRNA | Design e otimização de sequências codificantes | Design de sequência CDS e otimização de codons | 1-3 | Arquivo de sequência |
Design e otimização de sequências não codificantes | Design e otimização de UTR, sequências polyA | |||
Preparação do Plasmídeo Modelo de Transcrição | Preparação de plasmídeo recombinante | Síntese de genes | 7 a 10 | |
Amplificação e extração de plasmídeos | 4 | |||
Linearização e purificação de plasmídeos | ||||
transcrição in Vitro de mRNA | Incapamento co-transcricional (método de um passo) | Transcrição in vitro (IVT) / Analogo de cap | 1-2 | N/A |
Modificações de nucleotídeos (modificações de UTP/CTP) | ||||
Remoção do template de DNA (DNAse I) | ||||
Capping enzimático (processo em duas etapas) | IVT | 2-3 | ||
Modificações de nucleotídeos (modificações de UTP/CTP) | ||||
Remoção do template de DNA (DNAse I) | ||||
purificação de mRNA (precipitação com cloreto de lítio/magnetites) | ||||
Capping enzimático | ||||
purificação de mRNA | Esquema de purificação convencional | Precipitação com cloreto de lítio | 1 | substância medicamentosa de mRNA |
Purificação com ímãs magnéticos | ||||
Esquema de purificação com coluna cromatográfica | Combinação de múltiplos métodos de cromatografia | 1-2 | ||
Troca de tampão | Ultrafiltração | 1 | ||
liofilização de mRNA | Liofilização | Pré-congelamento | 2-3 | pó liofilizado de mRNA |
Secagem primária (sublimação) | ||||
Secagem secundária (dessorção) | ||||
encapsulação de mRNA | Encapsulamento em LNP | Encapsulamento em LNP | 2-3 | produto farmacêutico de mRNA-LNP |
Concentração e troca de tampão | ||||
análise de Qualidade de mRNA | substância ativa de mRNA / pó liofilizado | Concentração, pureza | 1 | Relatório de teste |
Integridade, eficiência de capping, distribuição do cauda polyA | 2-5 | |||
produto farmacêutico de mRNA-LNP | Eficiência de Encapsulamento | 1 | ||
Tamanho e distribuição de partículas | ||||
Carga superficial | ||||
validação de Expressão de mRNA | avaliação de células 293T | Placa de células | 4 | |
Transfecção transitória de células | ||||
Observação do sinal de fluorescência | 1-3 | |||
Western blot (WB) / Ensaios imunoenzimáticos (ELISA) |
cap no 5' |
▪ Sem cap ▪ Cap0, co-capado ▪ Cap1, co-capado ▪ Cap1, encapamento enzimático |
uTR 5'/UTR 3' |
▪ Sequência UTR natural ▪ Sequência UTR mutante/engenhada |
cauda de PoliA 3' |
▪ Cauda de 100A ~120A (recomendado) ▪ Cauda de poliA segmentada ▪ Outras caudas personalizadas |
Nucleosídeos modificados |
▪ Bases não modificadas ▪ Pseudouridina (Ψ) ▪ N1-Metilpseudouridina (N1Ψ) ▪ 5-metilcitosina (m5C) ▪ 5-metiluridina (m5U) ▪ 5-metoxiuridina (5moU) ▪ 2-tioridina (s2U) ▪ 2′-O-metil-U ▪ Outras modificações |
Fluxo Integrado de Serviços
Fornece uma série de serviços desde o design de sequências no início até a preparação de mRNA, controle de qualidade e validação de expressão no final.
Design e Otimização de Sequências na Vanguarda Internacional
O design e a otimização profissionais de sequências de mRNA facilitam a expressão eficiente do mRNA.
Modificações Nucleotídicas Diversificadas
Aumentam efetivamente a expressão do mRNA e reduzem as respostas imunológicas adversas ao mRNA.
Plataforma de Purificação Madura
Ao combinar um método de purificação convencional e auto-desenvolvido, amostras de mRNA são obtidas com alta pureza.
Plataforma de Controle de Qualidade Completa
Enriquecem opções de QC para atender aos requisitos de testes rotineiros, como concentração, pureza A260/280 e integridade, além de requisitos rigorosos de controle de qualidade, como eficiência de capping/distribuição de poliA.
Entrega Rápida
O mRNA personalizado pode ser entregue em até 7 dias, exceto para síntese de sequências terceirizada.