O mRNA tem sido amplamente utilizado no estudo de funções de genes ou proteínas. Enquanto isso, é comum no desenvolvimento de produtos biológicos profiláticos e terapêuticos. Como estratégia de síntese comum para moléculas de RNA, a transcrição in vitro (IVT) permite-nos obter transcrições personalizadas de forma eficiente.
A Yaohai Bio-Pharma estabeleceu um conjunto de tecnologias de síntese de mRNA para fornecer RNA de alta qualidade, como design e otimização de sequência, IVT, purificação, liofilização e encapsulamento de nanopartículas lipídicas (LNP). Todos os produtos são lançados sob rigorosos padrões de controle de qualidade (QC).
Com o surto da pandemia de COVID-19 em 2020, a tecnologia de mRNA avançou a passos largos e as suas pesquisas e aplicações relacionadas ganharam um desenvolvimento sem precedentes, incluindo vacinas profiláticas para prevenção de doenças infecciosas, vacinas e medicamentos terapêuticos oncológicos, terapia tumoral, proteínas terapia de reposição, medicina regenerativa e terapia celular e genética (CGT).
Vacina mRNA | Terapêutica de mRNA |
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Extração | Serviço Opcional | Detalhes de serviços | Período de entrega (dia útil) | Entregável |
Projeto e otimização de sequência de mRNA | Projeto e otimização de sequências de codificação | Projeto de sequência CDS e otimização de códons | 1-3 | Arquivo de sequência |
Projeto e otimização de sequências não codificantes | Projeto e otimização de sequências UTR, poliA | |||
Preparação de plasmídeo de modelo de transcrição | Preparação de plasmídeo recombinante | Síntese genética | 7-10 | |
Amplificação e extração de plasmídeo | 4 | |||
Linearização e purificação de plasmídeos | ||||
Transcrição in vitro de mRNA | Limite co-transcricional (método de uma etapa) | Transcrição in vitro (IVT)/Análogo Cap | 1-2 | N/D |
Modificações de nucleotídeos (modificações UTP/CTP) | ||||
Remoção de modelo de DNA (DNase I) | ||||
Cobertura enzimática (processo de duas etapas) | IVT | 2-3 | ||
Modificações de nucleotídeos (modificações UTP/CTP) | ||||
Remoção de modelo de DNA (DNase I) | ||||
Purificação de mRNA (cloreto de lítio/esferas magnéticas) | ||||
Limitação enzimática | ||||
Purificação de mRNA | Esquema de purificação convencional | Precipitação de cloreto de lítio | 1 | substância medicamentosa mRNA |
Purificação de contas magnéticas | ||||
Esquema de purificação de coluna de cromatografia | Combinação de vários métodos de cromatografia | 1-2 | ||
Troca de buffer | Ultrafiltração | 1 | ||
Liofilização de mRNA | Liofilização | Pré-congelamento | 2-3 | pó liofilizado mRNA |
Secagem primária (sublimação) | ||||
Secagem secundária (dessorção) | ||||
encapsulamento de mRNA | Encapsulamento LNP | Encapsulamento LNP | 2-3 | produto mRNA-LNPDrug |
Concentração e troca de buffer | ||||
Análise de qualidade de mRNA | Substância medicamentosa mRNA/pó liofilizado | Concentração, pureza | 1 | Relatório de teste |
Integridade, eficiência de nivelamento, distribuição de cauda poliA | 2-5 | |||
Medicamento mRNA-LNP | Eficiência de encapsulamento | 1 | ||
Tamanho e distribuição de partículas | ||||
Carga de superfície | ||||
Validação de expressão de mRNA | Avaliação de células 293T | Revestimento celular | 4 | |
Transfecção transitória de células | ||||
Observação do sinal de fluorescência | 1-3 | |||
Western blot (WB)/ensaio imunoenzimático (ELISA) |
Boné 5' | ▪ Sem limite ▪ Cap0, co-limitado ▪ Cap1, co-limitado ▪ Cap1, capeamento enzimático |
5' UTR/3' UTR | ▪ Sequência UTR da natureza ▪ Sequência UTR mutante/projetada |
Cauda PolyA de 3' | ▪ Cauda 100A ~120A (recomendado) ▪ Cauda poliA segmentada ▪ Outras caudas personalizadas |
Nucleosídeos modificados | ▪ Bases não modificadas ▪ Pseudouridina (Ψ) ▪ N1-Metilpseudouridina (N1Ψ) ▪ 5-metilcitosina (m5C) ▪ 5-metiluridina (m5U) ▪ 5-metoxiuridina (5moU) ▪ 2-tiouridina (s2U) ▪ 2′-O-metil-U ▪ Outras modificações |
Fluxo de serviço integrado
Fornece uma série de serviços desde o design de sequência de front-end até a preparação de mRNA de back-end, controle de qualidade e validação de expressão.
Design e otimização de sequências de última geração internacional
O design e a otimização profissionais da sequência de mRNA facilitam a expressão eficiente do mRNA.
Modificações Diversificadas de Nucleotídeos
Aumente efetivamente a expressão do mRNA e reduza as respostas imunes adversas do mRNA.
Plataforma de Purificação Madura
Ao combinar um método de purificação convencional e autoprojetado, amostras de mRNA são obtidas com alta pureza
Plataforma completa de controle de qualidade
Enriqueça as opções de CQ para atender aos requisitos de testes de rotina, como concentração, pureza e integridade do A260/280, bem como aos requisitos de controle de alta qualidade, como eficiência de nivelamento/distribuição de poliA.
Entrega rápida
O mRNA personalizado pode ser entregue em até 7 dias, exceto para síntese de sequência terceirizada.