No processo de preparação da transcrição in vitro (IVT) mRNA, é necessário DNA plasmídico linearizado como modelo de transcrição IVT com a ajuda da polimerase T7 RNA. O DNA plasmídico de alta qualidade é crucial para a transcrição in vitro.
Com base na plataforma de serviço madura de preparação de plasmídeos, a Yaohai Bio-Pharma pode oferecer um serviço de preparação de DNA plasmídico linearizado de alta pureza e alto padrão para alcançar uma transcrição IVT eficiente.
Detalhes dos Serviços
| Processo |
Serviço Opcional |
Detalhes do Serviço |
Prazo de Entrega (dia útil) |
| Preparação de Plasmídeo Circular |
Síntese de genes |
Síntese de Gene (Terceiros) |
7 a 10 |
| Amplificação de Plasmídeo |
Amplificação de Plasmídeo |
2 |
| Extração de Plasmídeo |
| Preparação de Plasmídeo Linearizado |
Linearização e purificação de plasmídeos |
Linearização de plasmídeo |
1 |
| Purificação de DNA Linearizado |
| Controle de qualidade do DNA de plasmídeo |
Concentração e pureza |
Espectrofotometria Ultravioleta (UV) |
1-2 |
| Conformação de plasmídeo |
Eletroforese em Gel de Agarose (AGE) |
| Eletroforese Capilar (CE) - Opcional |
| Identificação de Plasmídeo |
Identificação de enzima de restrição/AGE |
Nossos Recursos
- Template de Plasmídeo Freecut
Seleção flexível de métodos de linearização
Otimização dos métodos de extração e purificação de DNA para alcançar altas taxas de recuperação.
- Controlo de qualidade rigoroso
Padrões rigorosos de controle de processo, com uma taxa de conformação super-helicoidal de amostras de plasmídeos para pesquisa de mais de 80%.
- Processo de Plataforma Madura
Serviços de preparação e controle de qualidade de plasmídeos de alto padrão e alta eficiência para atender às necessidades experimentais.
Estudo de Caso
Tome o catálogo Yaohai Bio-Pharma mRNA_luciferase como exemplo, o plasmídeo modelo de transcrição (grau de pesquisa) possui uma razão super-helical de mais de 90%, uma razão de linearização próxima a 100% e uma razão subsequente de transcrição de até 1:200 (DNA de plasmídeo linearizado:mRNA).
O mRNA_luciferase obtido através da preparação de um plasmídeo linearizado como modelo é transfetado em células 293T, e a atividade da reação enzima-substrato é avaliada 24 h após a transfecção.
Um sinal óbvio de forte atividade de luciferase pode ser detectado, ou seja, a proteína de luciferase é expressa eficientemente, sugerindo que a pureza do modelo de transcrição pode satisfazer plenamente o requisito de preparação de mRNA de alta qualidade.
Ensaio de Razão de Plasmídeo Super-enrolado
Validação da Expressão de mRNA de Luciferase In Vitro
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