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Preparação de modelo de plasmídeo

Preparação de modelo de plasmídeo

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ARN de IVT

Preparação de modelo de plasmídeo

A preparação de CircRNA requer RNA linear como material precursor (precursor de RNA) para ciclização, onde o precursor de RNA é geralmente preparado usando DNA plasmídico linearizado como modelo de transcrição e transcrito in vitro com a ajuda de RNA polimerase T7.

DNA plasmídico de alta qualidade é essencial para a transcrição in vitro (IVT). Com base na plataforma de serviço de preparação de plasmídeo maduro, a Yaohai Bio-Pharma pode fornecer um serviço de preparação de DNA de plasmídeo linearizado padrão (pDNA) de alta pureza para garantir a integridade dos produtos IVT.

indefinido

Detalhes dos serviços
Extração Serviço Opcional Detalhes de serviços Período de entrega (dia útil)
Preparação de plasmídeo circular Síntese genética Síntese genética (terceiros) 7-10
Amplificação de plasmídeo Amplificação de plasmídeo 2
Extração de plasmídeo
Preparação de plasmídeo linearizado Linearização e purificação de plasmídeos Linearização de plasmídeo 1
Purificação de DNA de linearização
Controle de qualidade do DNA plasmidial Pureza de concentração Espectrofotometria ultravioleta (UV) 1-2
Conformação plasmidial Eletroforese em gel de agarose (AGE)
Eletroforese capilar (CE) - opcional
Identificação do plasmídeo Identificação de enzimas de restrição/IDADE
Nossos recursos
  • Plasmídeo de modelo de corte livre

Seleção flexível de métodos de linearização

  • Alta taxa de recuperação

Otimização dos métodos de extração e purificação de DNA para atingir altas taxas de recuperação.

  • Controle de qualidade rigoroso

Padrões rigorosos de controle de processo, com uma taxa de conformação superhelicoidal de amostras de plasmídeos para pesquisa superior a 80%.

  • Processo de plataforma madura

Serviços de preparação de plasmídeos e controle de qualidade de alto padrão e alta eficiência para atender às necessidades experimentais.

Estudo de caso

Tomando como exemplo o produto mCherry circRNA da Yaohai Bio-Pharma, a proporção superenrolada de amostras de plasmídeo de modelo de transcrição (grau de pesquisa) é superior a 70%, com uma taxa de linearização próxima de 100%.

O circRNA mCherry é preparado com plasmídeo linearizado como modelo e transfectado em células 293T. Alto nível de expressão de fluorescência (fluorescência vermelha) é detectado após 24 horas de transfecção, que será aumentado após 48 horas, e ainda pode ser detectado no 7º dia e no 14º dia após a transfecção.

A proteína mCherry é expressa de forma estável e eficiente, e a pureza do modelo transcricional pode atender aos requisitos do medicamento circRNA (DP) com alta qualidade.

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Validação de expressão in vitro de mCherry circRNA

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