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Triagem de Deformação

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CDMO microbiano

Triagem de Deformação

A importância da triagem de deformação

A triagem de hospedeiros adequados é necessária para o desenvolvimento de CMC biológico, que determina a qualidade e consistência do produto e do processo de fabricação. O objetivo direto da triagem do hospedeiro é fornecer um banco de células primárias (PCB) candidato, com altos níveis de expressão e alta estabilidade, tanto em termos de estabilidade de passagem quanto de estabilidade de armazenamento. A triagem de hospedeiros adequados é necessária por duas razões principais:

 - Primeiro, selecionar o hospedeiro microbiano com alto nível de expressão. Existem várias cepas comercialmente disponíveis, que são usadas para expressar diferentes tipos de proteínas, como proteínas tóxicas, proteínas solúveis ou proteínas eucarióticas. 

 - Em segundo lugar, rastrear o hospedeiro com estabilidade genética. O teste de estabilidade genética é um ponto chave em todo o ciclo de vida da produção. Sugere-se que a elevada estabilidade genética seja reconhecida como outra característica chave para uma estirpe adequada.

Palavras-chave: seleção de cepas microbianas, triagem de cepas microbianas, triagem de alto rendimento de bactérias ou leveduras, triagem de cepas de alta produção, triagem de cepas altamente estáveis, triagem de cepas genéticas estáveis ​​Aplicação: medicina humana, medicina animal, vacina, biologia sintética, grande molécula recombinante produtos biológicos, reagente biológico

Serviços de triagem de cepas da Yaohai Bio-Pharma

Beneficiando-nos de mais de 10 anos de experiência da CDMO em produtos biológicos microbianos, apoiamos o desenvolvimento e a fabricação de várias moléculas grandes, incluindo vacinas de subunidades recombinantes, partículas semelhantes a vírus (VLP), hormônios (insulina, GLP-1, hormônio do crescimento), citocinas ( Interleucina-2/IL-2, IL-15, IL-21), fatores de crescimento (EGF, FGF, NGF), nanocorpos/anticorpos de domínio único (sdAbs), enzimas, etc. 

Acumulamos experiências ricas na seleção de vários tipos de vetores plasmídicos e hospedeiros microbianos, incluindo bactérias Escherichia coli (E. coli), e fermento Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha). Podemos encontrar o melhor sistema de expressão para seus produtos biológicos exclusivos. 

Coletamos vários hospedeiros microbianos com fontes claras e CoA padrão, incluindo E.coli expressão e expressão de levedura.

Detalhes de serviços

Serviços

Detalhes de serviços

Cronograma/dia mínimo

Entregas

Construção de cepas (E. coli)

Transformação de plasmídeo (multi-hosts)

5

COA de anfitriões comerciais Relatório de construção de tensão

Verificação PCR

Purificação de tensão

Preservação de tensão

Construção de cepa (levedura)

Preparação de células de levedura competentes

10

Linearização de plasmídeo

Eletrotransformação

Triagem de resistência/deficiência nutricional

Purificação de tensão

Preservação de tensão

Triagem de Host Adequado

Extração de DNA de plasmídeo ou genoma

15-20

Processo de triagem de hospedeirosCOA de cepas projetadas

Verificação de PCR, digestão com enzimas de restrição

Sequenciamento do gene alvo

Triagem de hosts de alta expressão

Triagem de hospedeiros com estabilidade genética

Preservação de tensão
Estudo de caso
Um hospedeiro adequado melhora o nível de expressão proteica em 2.5 vezes.

Somos contratados para desenvolver produtos de alta produção E. coli variedade. E tentamos três tipos de comercial E. coli hospedeiros, com base nas características da proteína alvo. É demonstrado que a cepa S1-1 e S1-2 (Fig A: Pista 1,2) melhorou o nível de proteína em 3.5 vezes do que a cepa inicial do cliente (Fig A: Pista 3). 

Além disso, a cepa S1-1 apresentou alta estabilidade genética (Fig B), e foi reconhecida como cepa candidata para banco primário de células (PCB).

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Nossos recursos de serviço

Experiência comprovada com vários hospedeiros microbianos, por exemplo, E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P.pastoris SMD1168H, X-33, GS115, cepa PichiaPink 1/2/3/4; S. cerevisiae e H. polimorfo.

Temos experiência com E. coli secreção periplasmática, expressão de corpos solúveis e de inclusão, bem como expressão intracelular ou de secreção de levedura. Não adicionamos antibióticos ou adicionamos antibióticos sob orientação regulatória. 

Estabelecemos uma plataforma de triagem de alto rendimento para rastrear cepas estáveis ​​e de alta produção de mais de cem cepas candidatas.

É garantido que o processo de engenharia e triagem de deformação seja rastreável, sob o Good Data and Record Management.

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