Reagente Enzimático

Reagente Enzimático

Modalidade

Proteases de remoção de tags

Para melhorar a solubilidade e simplificar o processo de purificação de proteínas recombinantes, os pesquisadores geralmente adicionam tags de fusão, das quais His-tag, proteína de ligação à maltose (MBP) e glutationa-S-transferase (GST) são comumente usadas.

Embora marcada como uma sequência extra de proteína, ela deve ser removida para manter a atividade biológica na indústria farmacêutica. A remoção de tags de fusão requer proteases específicas do local, como enteroquinase (EK), trombina, protease do vírus da gravação do tabaco (TEVp), protease 3C do rinovírus humano (HRV3C), protease da proteína modificadora da pequena ubiquitina (SUMO), vírus da mancha das veias do tabaco ( TVMV) protease e carboxipeptidase A/B (CPA/CPB).

Formato	Enzima	Site de reconhecimento
Endoproteases de remoção de tags	Enteroquinase (EK), Enteropeptidase	DDDDK↓
	Trombina	LVPR↓GS
	Protease TEV	ENLYFQ↓G
	Protease HRV3C	LEVLFQ↓GP
	Protease SUMO	Estrutura terciária SUMO
	Protease TVMV	ETVRFQG↓S
Exoproteases de remoção de tags	Carboxipeptidase A (CPA)	Aminoácidos C-terminais, exceto Pro, Lys e Arg
Exoproteases de remoção de tags	Carboxipeptidase B (CPB)	C-terminal Lys e Arg

Outras proteases

Aplicação	Enzima	função
Outras proteases	Protease K	Uma serina protease que digere proteínas hidrolisando ligações peptídicas.
	IdeS, protease IgG	Enzimas degradadoras de IgG (Ides) que clivam em um local específico da imunoglobulina G (IgG), gerando fragmentos Fab e Fc
	Protease IgA1	Enzima proteolítica que cliva sítio específico na sequência da região dobradiça da imunoglobulina A1 humana (IgA1).

Nuclease

Aplicação	Enzima	função
Nuclease	Nuclease	Cliva ácidos nucléicos (DNA ou RNA) hidrolisando as ligações fosfodiéster.
Nuclease	Restringir enzima	Endonuclease que cliva o DNA em locais específicos ou próximo a eles.

Amidase

Aplicação	Enzima	função
Amidase	PNGase F	Cliva entre os resíduos mais internos de GlcNAc e asparagina de oligossacarídeos com alto teor de manose, híbridos e complexos.

todas as categorias

Reagente Enzimático

Modalidade