Reagente Enzimático

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Proteases de Remoção de Tags

Para melhorar a solubilidade e simplificar o processo de purificação de proteínas recombinantes, os pesquisadores geralmente adicionam tags de fusão, das quais His-tag, proteína de ligação à maltose (MBP) e glutationa-S-transferase (GST) são comumente utilizadas.

Embora marcada como uma sequência extra de proteína, ela deve ser removida para manter a atividade biológica na indústria farmacêutica. A remoção das tags de fusão requer proteases específicas, como enterocinase (EK), trombina, protease do vírus do amarelamento do tabaco (TEVp), protease do rinovírus humano 3C (HRV3C), protease de pequena proteína modificadora ubiquitina (SUMO), protease do vírus do mosaico da veia do tabaco (TVMV) e carboxipeptidase A/B (CPA/CPB).

Tipo	Enzima	Sítio de Reconhecimento
Endoproteases de remoção de tags	Enterocina (EK), enteropeptidase	DDDDK↓
	Trombina	LVPR↓GS
	Protease TEV	ENLYFQ↓G
	Protease HRV3C	LEVLFQ↓GP
	Protease SUMO	Estrutura terciária de SUMO
	Protease TVMV	ETVRFQG↓S
Exoproteases de remoção de tags	Carboxipeptidase A (CPA)	Aminoácidos C-terminais, exceto Pro, Lys e Arg
Exoproteases de remoção de tags	Carboxipeptidase B (CPB)	Lys e Arg C-terminais

Outras proteases

Aplicação	Enzima	Função
Outras proteases	Protease K	Uma serina protease que digere proteínas hidrolisando os vínculos peptídicos.
	IdeS, protease IgG	Enzimas degradantes de IgG (Ides) que cleavam em um sítio específico do imunoglobulina G (IgG), gerando fragmentos Fab e Fc
	Protease IgA1	Uma enzima proteolítica que cleiva um sítio específico na sequência da região de dobradiça da imunoglobulina A1 (IgA1) humana.

Nuclease

Aplicação	Enzima	Função
Nuclease	Nuclease	Cleava ácidos nucleicos (DNA ou RNA) por hidrólise dos vínculos fosfodiestéricos.
Nuclease	Restringir enzima	Uma endonuclease que cleava o DNA em ou próximo a sítios específicos.

Amidase

Aplicação	Enzima	Função
Amidase	PNGase F	Cleiva entre o GlcNAc mais interno e os resíduos de asparagina dos oligossacarídeos de alta manose, híbridos e complexos.

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